2 д реснички: Наращивание ресниц 2д | Lash Flash

Содержание

Наращивание ресниц 2д: преимущества и особенности процедуры

Роскошный, выразительный взгляд полностью изменяет внешность женщины, делая ее более привлекательной и соблазнительной. Но далеко не каждая представительница прекрасного пола полностью довольна густотой и длиной своих ресничек. Женщины покупают дорогостоящие туши и сыворотки, «обещающие» моментально удлинить ресницы на несколько миллиметров, чаще всего не получая положительного результата.

На помощь приходят современные косметические техники, среди которых – наращивание 2Д. Это уникальный способ, позволяющий на несколько недель обзавестись длинными, пушистыми ресницами и избавить себя от использования декоративной косметики.

Специфика процедуры

Технология 2д – это объемное наращивание ресниц. Если специфика обычного удлинения заключается в прикреплении к реснице одного искусственного волоска, то при объемном крепится два, кончики которых расходятся в разные стороны. Как результат – роскошный объем, густота и выразительность глаз.

Основные особенности и преимущества двойного объема:

  • в отличие от поресничного способа, 2Д выглядит более натурально и привлекательно;
  • ресницы на несколько недель остаются длинными и пушистыми;
  • удобство и быстрота процедуры;
  • легкость и простота в уходе;
  • возможность проведения техники наращивания вне зависимости от природной густоты и объемности ресничек.

Профессиональный способ 2Д можно совмещать с различными техниками декора: современные модные тренды предлагают девушкам украшать глаза необычными разноцветными пучками, стразами и другими декоративными элементами.

Плюсы и минусы наращивания 2Д

Длинные и густые наращенные ресницы имеют свои плюсы и минусы, с которыми обязательно нужно ознакомиться перед посещением салона красоты. Это поможет предотвратить возможные ошибки в уходе за волосками и надолго сохранить взгляд ярким, глубоким и притягательным.

Минусы

К основным недостаткам искусственных ресничек многие девушки относят следующие моменты:

  • возможность аллергических реакций на используемые материалы;
  • необходимость в постоянном уходе за волосками;
  • регулярная коррекция;
  • при недостаточном профессионализме lashes-мастеров – кратковременность полученного эффекта;
  • высокая стоимость процедуры.

Но несмотря на минусы, техника двойного объема ресниц не теряет своей популярности среди современных модниц.

Плюсы

Основные преимущества ресниц 2Д, фото до и после которых можно увидеть на специализированных сайтах в интернете, женщины подчеркивают в многочисленных отзывах. Среди плюсов:

  • отсутствие необходимости в использовании декоративной косметики;
  • продолжительный результат – от 1 до 3-х месяцев;
  • натуральный эффект длинных и густых ресниц.

Многие девушки отдают предпочтение именно процедуре наращивания 2Д, так как она не портит и не утяжеляет натуральные реснички, одновременно делая их более пушистыми и привлекательными.

Виды наращивания ресниц 2Д

Крупнейшие салоны красоты предлагают своим клиенткам различные виды процедуры двойного наращивания ресниц, каждая из которых имеет свои особенности и специфику.
Наиболее популярные техники:

  • пучковая – является доступной и красивой, заключается в приклеивании двойных пучков, отличается длительным эффектом, который держится не менее 3-х недель;
  • японская – дорогостоящий способ, позволяющий создавать максимальный результат благодаря использованию высококачественных, натуральных материалов.

Разница между данными методиками заключается в том, что японская техника подразумевает приклеивание шелковых ресничек по одной, после чего из них уже формируются пучки. Считается более сложной и трудоемкой, требует от мастера высокого уровня профессионализма и предлагается только в крупнейших студиях красоты. Идеальный двойной объем сохраняется не менее 10-12 недель. При необходимости каждые 4 недели проводится коррекция.

Услуга пучкового наращивания 2Д-ресниц считается более доступной и бюджетной. Для изготовления волосков применяются искусственные материалы, чаще всего силикон. Может использоваться как по всему верхнему веку, так и только для уголков глаз.
Кроме того, выделяются следующие способы, позволяющие нарастить пушистые и густые ресницы:

  • классика – применение волосков незначительной длины;
  • кукольный – использование чрезвычайно длинных волокон;
  • лучистый – наращиваются реснички разной длины, что придает взгляду «распахнутое» выражение;
  • лисий – к внешним уголкам века клеятся очень длинные волоски.

Также выделяется отдельная разновидность – фантазийное или голливудское наращивание, при котором веки дополнительно украшаются блестками, стразами, разноцветными перышками.

Можно ли сделать в домашних условиях и как: когда лучше делать дома, а когда идти в салон

Если девушка хочет стать обладательницей удивительно длинных и роскошных ресниц, лучше всего записаться на процедуру к профессиональному мастеру в салон красоты. Это поможет получить желаемый эффект и избежать многих ошибок.

Самостоятельное домашнее наращивание рекомендуется только в том случае, если девушка окончила специальные курсы и досконально знает все этапы проведения процедуры и правила выбора наиболее подходящего материала.

Материал для наращивания

Для проведения двойного наращивания ресниц применяются различные материалы в зависимости от технологии. Японский метод предполагает использование натурального шелка, в результате этого ресницы выглядят более пышно и привлекательно. Но данный способ является дорогостоящим.

Также в некоторых салонах и косметологических кабинетах предлагается наращивание норковых или соболиных ресничек. Их толщина варьируется от 0,25 до 2 мм. Они выглядят более объемно и пышно, но удерживаются на глазах значительно меньший период времени.

Пучковое наращивание проводится с применением волосков из искусственных материалов, чаще всего силикона. Такие пучки выглядят менее натурально, им требуется регулярная коррекция. Но такая методика считается более доступной и бюджетной. Кроме того, силикон относится к гипоаллергенным материалам, которые подходят для чувствительных глаз.

Технология наращивания

После того, как клиентка обратится в салон, первое, что сделает профессионал, – оценит состояние естественных ресниц клиентки, выслушает пожелания по длине и густоте, а также подберет материалы для процедуры 2Д.
Основные этапы, как наращивать 2Д ресницы:

  1. Веки очищаются от остатков туши и других косметических средств при помощи специального препарата.
  2. Под глаза прикрепляются защитные наклейки, которые оберегают нижние ресницы во время проведения процедуры.
  3. При помощи пинцета и клея искусственные волоски или пучки прикрепляются к натуральным.

После этого мастер обязательно рассказывает клиентке обо всех особенностях и нюансах правильного ухода за искусственными волосками.

Как правильно подбирать ресницы для наращивания 2D

Перед тем как приступить к созданию двойного объема, косметолог в обязательном порядке оценивает состояние, длину, толщину и густоту натуральных ресниц клиентки. Это необходимо для того, чтобы подобрать наиболее подходящие волоски.

При выборе искусственных ресниц мастер придерживается нескольких правил. Во-первых, чаще всего без ограничений рекомендуется экспериментировать только с длиной, густота и толщина приклеенных ресничек должны соответствовать натуральным. Это поможет предотвратить дисбаланс и сделать взгляд более естественным.

Во-вторых, важную роль играет выбор материала. Чаще всего многие профессионалы и девушки отдают предпочтение силикону. Это очень легкий и практичный материал, который крайне редко становится причиной аллергических реакций. В большинстве случаев волоски из натурального шелка провоцируют покраснение и раздражение чувствительной кожи век.

Немаловажным является и изгиб волосков: они могут быть как прямыми, так и экстремально изогнутыми. В большинстве случаев косметологи ориентируются на природный изгиб ресниц клиентки.

Сколько времени занимает наращивание ресниц 2Д

В зависимости от выбранного способа наращивания весь сеанс длится не более 1,5-2 часов. Новички могут делать и 4 часа. В случае применения японской техники время процедуры может быть увеличено до 2,5 часов.

Уход за 2D-ресницами

На протяжении первых суток после проведения двойного наращивания категорически не рекомендуется умываться, необходимо постараться полностью исключить какой-либо контакт с влагой.
Другие правила ухода за глазами:

  • важное условие продолжительного и красивого результата – отказ от сна на животе, лицом в подушку;
  • не использовать косметику с плотной, жирной текстурой;
  • лучше всего не краситься тушью;
  • глаза нельзя тереть руками или полотенцем;
  • не следует применять специальные щипчики или другие приспособления для завивки ресниц.

Для умывания лучше всего воспользоваться слегка подогретой водой или обезжиренной «мицелляркой».

Гарантия хорошего и качественного наращивания – своевременная коррекция. Поэтому, если мастер рекомендует провести ее через 3-4 недели, не следует отказываться.

Сколько держатся

В зависимости от используемой технологии, качества применяемых материалов, профессионализма мастера и соблюдения всех правил ухода искусственные ресницы держатся от 3 недель до 3 месяцев. В большинстве случаев каждые 4 недели рекомендуется проводить процедуру коррекции.

Чем отличается наращивание ресниц 2Д от 3Д

Многие салоны красоты предлагают сеансы тройного и двойного наращивания ресниц. Каждая из этих техник пользуется широкой популярностью и имеет массу поклонниц. Основная разница заключается в том, что при способе 3Д к одной ресничке крепится одновременно три волоска, в то время как при 2Д – только два.

К преимуществам классической двойной методики относится более натуральный и естественный внешний вид глаз, минимальный уровень травмирования и ломкости своих ресниц. При системе 3Д ресницы получаются удивительно пушистыми и густыми, но это также и повышает нагрузку на веки.

Модные тенденции и новинки года

Для проведения различных фотосессий и праздничных мероприятий дизайнеры рекомендуют модницам воспользоваться техникой гламурного наращивания. Для этой цели применяются волоски ярких, насыщенных оттенков – серебристого, золотого, синего, зеленого, розового. Цветные волокна могут наклеиваться как по всему верхнему веку, так и только во внешних уголках.

Не менее стильный вариант – украшение век сияющими стразами или блестками. Они могут располагаться в хаотичном порядке или формировать оригинальный узор.

Коррекция

После создания двойного объема ресниц коррекция проводится не реже, чем раз в 4 недели. Использование пучковой техники требует корректировки после выпадения каждого пучка, в противном случае на веке появится заметный «голый» промежуток.

Для того чтобы определить необходимость исправления, нужно при помощи тонкой щеточки расчесать волоски. Большое количество выпавших ресничек свидетельствует о том, что пора нанести визит к своему мастеру. Лучше всего проводить наращивание и корректировку у одного человека, который будет использовать одни технологии и материалы.

Противопоказания

Несмотря на все преимущества, технология наращивания 2d имеет и определенные противопоказания, к которым относятся:

  • излишняя жирность кожи век;
  • конъюнктивит и другие заболевания офтальмологического характера;
  • повышенная склонность к аллергическим реакциям;
  • шрамы в области глаз, травмы;
  • чувствительная кожа век.

Процедура категорически не рекомендована девушкам со слишком тонкими и ослабленными ресницами. Искусственные волоски создают дополнительную нагрузку, что может ухудшить состояние естественных.

Меры предосторожности

Представительницам прекрасного пола нужно помнить, что наращивание 2D с использованием высококачественных материалов у профессионального мастера не может стоить слишком дешево, поэтому низкая цена сеанса – это серьезный повод для того, чтобы отказаться от него.

Лучше всего доверить красоту и здоровье своих глаз только крупным, популярным студиям красоты с большим количеством положительных отзывов от клиенток. Также не рекомендуется прибегать к услугам начинающих мастеров.

В интернете можно посмотреть массу видео о том, как именно проводится процедура двойного наращивания ресниц. Также обязательно нужно внимательно ознакомиться с санитарно-гигиеническими условиями в косметологическом кабинете. Это поможет избежать многих ошибок и надолго сохранить стойкий, роскошный результат.

Красивые ресницы сразу меняют взгляд женщины: он становится загадочным и женственным, таинственным и манящим. К сожалению, не все представительницы прекрасного пола могут похвастаться своими ресничками.

Поэтому была придумана технология двойного наращивания. Прежде чем решиться на такую процедуру, необходимо ознакомиться с преимуществами и недостатками, а также противопоказаниями.

Способы формирования пучков для объемного наращивания ресниц. Советы от Melady.by

Начнем с техники 2D наращивания
 

Она самая простая. В руках её делать нет смысла, потому что это слишком долго. Гораздо быстрее делать наращивание 2д с ленты в любом случае.

 

 Итак, в первом случае одну ресничку в ленте отставляете кончиком пинцета, вторую выделяете. И затем снимайте на себя и чуть-чуть наверх.

Таким образом реснички получаются рядом и у нас получается плоская нога. Это первый способ.

 

 Следующий способ наращивания 2Д - когда вы отставляете сразу две реснички: приподнимаете и, не до конца снимая, отставили в бок. Левый усик – влево, правый усик – вправо.

Таким образом вы выбираете нужное для вас раскрытие, какое вам больше нравится, захватываете реснички и также снимаете их вверх. После заведения в клей у нас опять же останется плоская ножка.

 

 Третий способ - это раскачка.

Когда вы берете сразу 2 реснички и качаете их в пинцете, пока вам не понравится раскрытие: вправо-влево. То есть берёте 2 реснички, покачиваете вправо-влево, чуть-чуть ослабляя при этом пинцет.

Когда получили красивое раскрытие - всё сняли, опустили в клей - нога сошлась. Всё, красота! 🙂


Ресницы для наращивания, с которыми удобно работать, можно выбрать в каталоге:

 

 Четвёртый способ:

Когда вы берете нужно количество ресничек, снимаете полностью и ставите рядышком. И уже здесь на самой ленте непосредственно рядом формируйте пучок. В тот момент, когда он раскрывается наиболее красиво остается только его снять. Зажали-сняли.

 

 Пятый способ называется раскатка

Вы выделяете нужно количество ресниц чуть-чуть присняли, не до конца, и отставили слегка вправо (как бы положили обратно). Затем острым носиком вы как-бы раскатываете по ленте пучок. Сильно прижимать нельзя потому, что вы просто "вкатаете" пучок в ленту и не сможете снять либо пережмете реснички.

Немного покачайте вправо-влево, вправо-влево по ножке пучка, где он стоит на ленте – и вот он раскрывается. Когда раскрыли как вам нужно – сняли.

Раскатка годится для любого объема, чуть ли не до десяти ресниц. Вопрос только в том насколько ваш пинцет хорошо сможет взять эти десять ресниц и снять их ровно.

Всё также зависит от толщины с которой работаем, но оптимальным мы считаем пучок до 5 ресниц. Вот как на примере:

Осталось его только снять. Снимать желательно за серединку или ниже. И у нас получается аккуратный пучок с круглой ножкой.


Вся та же самая ленточная техника работает с пучками, даже если их раскладывать с другой стороны от края палетки/планшета (есть особые «извращенцы» 🙂 ). Процесс такой же: отставляем одну ресничку, далее, выхватывая ещё одну, зажимаем и снимаем. И вот, пожалуйста: пучок из двух ресниц. И второй такой же способ, как и с правой стороны ленты: присняли две ресницы, отставили в сторону, распушили как вам нравится и сняли.

 

Уделяем внимание ножке
 

 Чем быстрее вы сдёрните пучок, тем больше шансов того, что у вас будет круглой ножка. Чем медленнее вы его снимаете, тем больше шансов, что у вас будет плоская ножка.

Бывает, что вы сделали роскошный пучок, всё вроде бы классно, но слишком резко его сдёрнули, и у него перекрестилась ножка - стала некрасивой, разошлась. Казалось бы, нужно было бы его выбросить, так как ножка неоднородная. Но заведя его в клей и проведя по поверхности, на которой у вас налит клей, вы увидите, что у вас получился отличный пучок.

 

 

Теперь перейдем к ручной технике
 

 Способ первый: выделили нужное количество ресничек, вставили в пальцы. Затем перехватили пинцетом и качаете, пока вам не понравится раскрытие вашего пучка. Понравилось – отпускайте пальцы. И всё, пучок готов. Макаете его в клей – и вот вам пучок.

 

 Второй вариант – руками

Снимаете нужное количество ресничек в пальцы и кончиком пинцета раскрываете кончики пучка так, как вам хотелось бы видеть. Вы их раскрыли, вам нравится раскрытие –  тогда перехватываете пучок пинцетом. Главное при этом не ущипнуть себя за кожу потому что так у вас ничего не получится 🙂

 

 И ещё один вариант пучка в руках – это когда у него всегда получается плоская ножка. Берём нужно количество ресниц, зажимаем между двумя пальцами так чтобы ножка была прижата плоско. И затем, слегка расслабляя пальчики, которыми вы жмете пучок, расставляем усики настолько, насколько вам этого хочется. Вы сделали ему нравящееся вам раскрытие, и теперь просто перехватываете его пинцетом.

И пожалуйста: получился пучок ресниц с плоской ногой. Осталась только завести его клей.

 

Конечно для того, чтобы у вас получались классные пучки, необходимо работать только с самыми качественными и аккуратными ресницами.

 

 Действительно роскошные ресницы для наращивания, с которыми приятно работать можете посмотреть тут.

 

 

Автор: Магазин Melady

 

Если у вас остались какие-либо вопросы - обязательно звоните  - разберемся вместе! 🙂

Тел.:  +375 33 335-82-10 
(можно в Viber)

Почта: [email protected]

С уважением, Елена,
директор интернет-магазина
Melady.by


Интернет-магазин Melady.by - представитель компании "Barbara"

Сертифицированные
материалы

 

Регулярные поставки

 

Доставка по Беларуси

Ресницы 2д. Пучковые ресницы Lovely «Russian Volume» 2D

Ресницы для наращивания Lovely «Russian Volume» 2D

Изгиб C — самый популярный изгиб, подходит тем, кто обычно поднимает ресницы тушью. Зрительно раскрывает глаза.

Изгиб D — закрученные ресницы для эффекта накрашенных глаз, создают яркий и выразительный взгляд. Подойдут тем, кто активно подкручивает ресницы.


Серия RUSSIAN VOLUME — пучковые реснички для объёмного наращивания ресниц; идеально ровные на тонкой ножке, прекрасно держат форму, устойчивы к деформции и при этом достаточно мягкие.

LOVELY — эксклюзивный бренд производителя искусственных ресниц для поресничного и объёмного наращивания, и целой линейки средств для наращивания ресниц.

Ресницы Lovely изготовлены из высококачественного волокна: ресницы отлично держат изгиб, не ломаются и устойчивы к внешним воздействиям. Ресницы Lovely легко снимаются с ленты, удобны в работе, а плотное размещение на ленте позволяет разместить их большее количество в палетке. В линейке Lovely также присутствуют всевозможные средства для наращивания и уходу за ресницами.

ПЕРЕД НАРАЩИВАНИЕМ

Окрашивание — светлые ресницы настоятельно рекомендуется окрасить в черный цвет. Окрашивание произвести за 5-6 дней до наращивания.

Завивка — перед наращиванием и после не рекомендуется пользоваться процедурой завивки.

Тушь — нарашивание ресниц производится на чистые ресницы. Остатки туши могут повлиять на качество сцепки ресниц.

ПОСЛЕ НАРАЩИВАНИЯ

Ресницы нельзя мочить первые 48 часов после наращивания.

УХОД ЗА РЕСНИЦАМИ

Наращенные ресницы не требуют специального ухода, а это значит, что можно смело посещать бассейн, солярий, сауну и купаться в море.

Но все же нужно соблюдать некоторые правила:

  • не тереть ресницы
  • не спать лицом в подушку
  • макияж снимать обезжиренными средствами или на водной основе

ОФИЦИАЛЬНЫЙ ПРЕДСТАВИТЕЛЬ LOVELY | МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ НАРАЩИВАНИЯ РЕСНИЦ — РЕСНИЦЫ LOVELY RUSSIAN VOLUME

Ресницы 2Д - что это такое?

Техника наращивания ресниц эффект 2д – косметическая процедура, которая способствует визуальному преображению взгляда девушки после добавления искусственных нитей на веко. Однако небольшой объем технологии способствует незаметному увеличению прежнему количеству волосков на глазу, поэтому стоит учитывать особенности техники, чтобы получить положительный итог.

Суть техники 2Д

Техника наращивания ресниц объем 2d способствует прикреплению двух дополнительных ресничек на каждую волосяную фолликулу. Технология подразумевает получение естественной стилистики, так как относится к группе небольшого показателя густоты растительности глаза.

Однако и объемное наращивание ресниц 2d можно сделать, если использовать искусственные нити повышенной длины, выполнив работу в нестандартном способе.

Наращивание ресниц двойной объем – практически классическая техника, поэтому рекомендуется учитывать характерные черты косметической процедуры, чтобы в итоге после посещения салона получить аккуратную работу, которая визуально подходит клиенту.

Ограничения

Не всегда можно безопасно для девушки оказывать косметическую услугу, поэтому предварительно стоит уделить внимание противопоказаниям к посещению косметологии и выполнению методики.

Стандартно специалисты не советуют проводить технику при наличии параметров у женщины:

  1. Болезни и воспалительные процессы слизистой оболочки глаза. Ячмень, конъюнктивит или другие болезни негативно сказываются на оказании косметической услуги. После выполнения работы косметологом возможно ухудшения здоровья глаза женщины.
  2. Аллергическая реакция на расходные материалы, которые используются в центре. Для этого предварительно нужно уточнить их качество, чтобы предотвратить образование аллергии после наращивания ресничек двойной объем.
  3. Болезни кожи. Область вокруг глаз должна быть в здоровом состоянии, иначе появляется вероятность быстрого схождения результата способа.
  4. Слабые натуральные волоски века. При ослабленном состоянии здоровья растительности глаза после проведения наращивания ресниц объем 2d, природное состояние волосяного слоя ухудшится.

Учитывайте ограничения к тому, как правильно наращивать ресницы 2д, чтобы в результате получить положительный итог, который будет эффектно смотреться на глазах клиента.

Эффекты наращивания ресниц

Можно разнообразить классический вариант наращивания, чтобы изменить нарощенные ресницы 2д до и после посещения салона. Однако будьте аккуратны с нестандартными методами, чтобы смотрелась стилистика аккуратно, сочеталась с естественной внешностью женщины и скрывала ее недостатки.

Чтобы сделать необычный способ, нужно уделить внимание сочетанию особенностей строения лица и характерных черт технологии. Сколько держаться нарощенные ресницы 2д без коррекции также зависит от выполненного способа.

Сколько держится

Разница до и после наращивания ресниц 2д не всегда сильно заметна, так как делается только двойное увеличение показателя густоты. Это и подразумевает качество стойкости стилистики после посещения косметического салона.

Обычно держится способ до полутора месяцев при его равномерном распределении по веку клиента, выполнению классического варианта наращивания.

Однако можно и продлить длительность сохранения методики, если уделить этому предварительно внимание. Для этого рекомендуется проверить качество расходных материалов, которые используются в центре, соблюдать рекомендации специалиста перед и после посещения салона.

Чем разнообразить

Можно сделать 2д методику необычной, если добавить в нее цветные элементы. Цветные ресницы 2д аккуратно выделяют взгляд девушки, а небольшая густота искусственных нитей может незаметно сркрыть недостатки внешности клиента.

Использовать можно разные способы – градиент, заполнение только кончиков, или окрашивание всех волосков. Но будьте аккуратны с тремя цветами, так как они могут выглядеть неаккуратно:

  1. Красный. Оттенок может подчеркнуть синяки под глазами, оттеняя их. Не рекомендуется выбирать цветовую гамму девушкам, склонны к подобной особенности внешности.
  2. Желтый. Особенно блондинкам стоит аккуратно относиться к использованию нестандартных светлых тонов в макияже, потому что они могут сделать лицо клиента тусклым.
  3. Белый. Обычно используется в качестве напыления кончиков волосков для новогодней стилистики, но будьте аккуратны – не заполняйте всю растительность оттенком.

Посмотреть, как выглядят нарощенные ресницы 2д в цветной стилистике, можно у косметолога. Для этого попросите примеры его работ, чтобы предотвратить побочные эффекты, связанные с плохим сочетанием цветовой гаммы и лица клиента.

Как делается наращивание

Реснички 2д – практически классический вариант увеличения природной густоты волосяного слоя глаза, поэтому особенностей в том, как наращивают ресницы 2д, нет.

Стандартно сеанс длится полтора часа, так как специалисту не нужно выполнять сложные технологии при приклеивании волосков:

  1. Сначала мицеллярной водой обрабатывается поверхность века. Это способствует удалению остатков декоративной косметики в основании волосяных фолликул, естественной жировой прослойки ресничек.
  2. На нижнее веко накладывается подложка, чтобы фактор, как выглядит наращивание ресниц 2д, не испортился, из-за случайного склеивания волосков основой.
  3. При выполнении пучкового метода клей наносится на основание пучков, а для поресничной методики клеящая основа наносится вдоль линии роста ресничек. Пинцетом косметолог набирает волоски, а деревянной палочкой поправляет их расположение, чтобы работа получилось натуральной.
  4. От толщины ресниц для наращивания 2д зависит быстрота проведения работы, так как толстые волоски легче взять и закрепить мастеру. Будьте аккуратны с этим параметром, чтобы смотрелась работа естественно.
  5. После окончания визита одноразовая подложка открепляется, а девушке стоит уделить максимальное внимание волоскам в первые три часа после посещения косметологии. Отказ от механических воздействий способствует полноценному застыванию клею на веке.

Перед посещением салона проверьте качество расходных материалов, которые использует мастер. Так вы предотвратите негативные последствия, связанные со стойкость метода, его воздействию на здоровья клиента – раздражение, зуд, отек, аллергическая реакция.

Выводы

Реснички 2д – эффектная технология, которая преобразит внешность женщины при грамотном проведении косметической процедуры. Она визуально подходит практически всем девушкам, поэтому ее часто выбирают для повседневной носки или в качестве дополнения макияжа для торжественного случая.

Другие объемы наращивания ресниц:

Наращивание ресниц 2D объемы | Нарастить ресницы 2Д в Минске

Наращивание ресниц 2D объемы. 

Продолжаем знакомить вас ближе с такой процедурой, как наращивание ресниц.

Мы уже говорили о классическом наращивании ресниц и 1.5D объеме, пришло время наращивания 2D объема. 

💎 Объемное наращивание ресниц 2D объемы 💎 предполагает создание более пышных и объемных ресниц. 
Это достигается путем наклеивания нескольких искусственных ресничек на одну свою, а конкретно в случае 2D наращивания – 2 искусственные реснички ⭐⭐

Такой процесс наращивания ресниц более трудоемкий по сравнению с классическим, но опытному мастеру не составит труда выполнить любой вид наращивания ресниц, в том числе 2Д объем 💫💫💫

При двойном полном объеме взгляд становится более распахнутым и выразительным. Так что же эффектнее смотрится? 2D или классический объем?

Густота и толщина родных ресничек у всех девочек разная, поэтому на густых ресницах классическое наращивание может смотреться более эффектнее, чем 3D-объем на редких и слабых ресничках.

Если вы обладательница ресниц средней густоты, то для создания естественного взгляда подойдет классика, а если вы все же желаете эффектные пушистые ресницы, то здесь отлично подходит 2D наращивание, для более объемных ресниц — 3D-объем💃

Среди преимуществ данной методики наращивания можно выделить:
💟 длительную фиксацию результата;
💟 естественный и аккуратный вид объемных волосков;
💟 один из самых быстрых способов придания ресницам естественного объема.

При выборе технологии наращивания не забывайте о консультации с вашим lash-мастером. Именно он подберет наиболее подходящий вариант, который подчеркнет всю красоту ваших глазок.

Наращивание ресниц 2D объемы можно сделать по адресам:
ул. Романовская Слобода, 24 (ст.м Фрунзенская) +375 29 6798816;
ул. Щорса, 11 (ст.м Грушевка) +375 29 7798816.

Всегда ваша, студия дизайна взгляда Beauty Eyes.

в чем особенность этой технологии

Сегодня хочу подробнее рассказать вам об объемном наращивании (2D и 3D). Чем такие варианты отличаются от классического наращивания, в каких случаях их можно использовать, а в каких лучше отказаться от дополнительного объема.

Объемное наращивание «двойной объем» является популярной процедурой среди девушек всех возрастов. Оно позволяет получить всего по максимуму: и выразительности, и яркости, и соблазнительности.

При классическом наращивании выполняется приклеивание к каждой натуральной реснице по одной искусственной. Эта процедура способна визуально придать глазам яркости, четкости за счет увеличения длины и незначительного увеличения объема ресниц. Если используется клей черного цвета, то удается добиться также эффекта тонкой аккуратной подводки на верхнем веке.

При наращивании 2D на каждую натуральную приклеивается по две искусственных ресницы. Причем клеятся они не одна на другую, а расходятся кончиками в разные стороны, что создает не только дополнительную густоту ресничного ряда, но и кокетливую пушистость ресниц, которая так нравится представителям мужского пола.

Эффект от наращивания двойного объема ресниц получается достаточно натуральным, при этом объем выглядит потрясающе! Профессиональные лашмейкеры, возможно, и увидят ваш «секрет», но окружающие парни точно не поймут, что ресницы ненатуральные. Поэтому чрезмерной кукольности и искусственности можете не бояться.

Также как и при классическом наращивании, при «двойном объеме» могут воссоздаваться разные эффекты: кошачий, беличий, лисий, кукольный и т.п. Какой именно эффект подойдет к вашей внешности, а особенно к форме ваших глаз, посоветует лашмейкер.

Также при наращивании 2D могут использоваться ресницы самых разных цветов для создания ультрамодного цветного наращивания, которое станет ярким акцентом вашего образа как в повседневной жизни, так и на любых вечеринках.

 

Не стоит забывать и про возможность различных украшений – декора ресниц: стразы, перья, блестки и многое другое. Декор всегда поможет украсить ваши ресницы перед особенным событием.

Когда стоит делать наращивание 2D?

  • Прежде всего, когда нужен дополнительный объем ресниц. Если у вас здоровые ресницы нормальной толщины, однако они достаточно редкие, и вам не удается добиться нужного результата с помощью обычного классического наращивания.
  • Вам не хочется красить ресницы тушью, при этом вы хотите всегда иметь безупречный макияж глаз. При двойном объеме даже без капли макияжа глаза будут иметь великолепный внешний вид в любое время суток и при любых обстоятельствах.

Не стоит делать двойной объем

  1. при собственных густых ресницах (зачем платить за более дорогую процедуру и получать неестественный вид ресниц, когда можно добиться отличной выразительности и яркости глаз с помощью классического наращивания?)
  2. при тонких ослабленных натуральных ресницах (в данном случае нужно избегать повышенной нагрузки на натуральные ресницы, чтобы их не травмировать. Классическое наращивание с помощью тонких искусственных ресничек позволит получить пленительный взгляд, создаст эффект длинных и пушистых ресниц и не будет утяжелять натуральные ресницы).

При 3D наращивании к одной натуральной крепятся, соответственно, три искусственные реснички. Благодаря такому варианту создается максимальный объем, который может носиться в повседневной жизни.

Нельзя сказать, что 3D наращивание выглядит неестественно. При грамотном выполнении оно смотрится так, как будто природа очень щедро наградила девушку роскошными натуральными ресницами. Как и в случае с двойным наращиванием, профессионал заметит, что выполнено наращивание, для окружающих наращивание будет смотреться как ваши «родные» накрашенные тушью ресницы.

Вообще к одной реснице можно приклеить и 10 искусственных, однако это совершенно лишнее и, чтобы добиться красивого результата, нужно чувствовать меру во всем. Часто объемы 4 D и выше используются, чтобы создать определенный образ для фотосъемки, перед выступлением, для девушек, работающих в сфере шоу-бизнеса.

Что хочется добавить, носить двойное или тройное наращивнаие постоянно не рекомендуется. Имея здоровые натуральные ресницы, вы можете носить классическое наращивание, без необходимости его снятия для отдыха довольно длительный период 1 год, а вот при двойном или тройном наращивании ресницам необходим отдых через 1-3 месяца непрерывного ношения.

Если есть вопросы, вы можете смело задавать их мне по имейлу или телефону. Не теряйте времени, приходите ко мне на наращивание ресниц, и гарантированно получайте скидку на первую процедуру!

 

Теги: [ 2d ресницы, 2д на густые ресницы, ресницы классика и 2д, наращивание ресниц 2d технология, объемное наращивание ресниц 2d, нарощенные ресницы двойной объем, ресницы 2д кукольный эффект, наращивание ресниц классика и 2д, наращивание ресниц 2d эффект, что такое 2d наращивание ресниц, 2d наращивание ресниц технология, наращивание 2д ]

 

Ресницы с 2д эффектом, пошаговая инструкция

В современном мире существует множество способов изменить свою внешность. К нему относится разнообразное наращивание. Нарастить можно:

  • волосы;
  • ресницы;
  • ногти и т.д.

В данной статье мы рассмотрим, как нарастить ресницы с 2д эффектом. Для начала ознакомьтесь с фото подборкой:

Наращивание ресниц 2d — что это такое?

Классическое наращивание знакомо многим, но чем же отличается оно от объёмного. При классическом-на каждую ресничку приклеивается по одной дополнительной волосинке, а при наращивании 2д клеятся по две, при этом добавляется объём и взгляд становится боле выразительным. Процедуру наращивания, конечно, лучше проводить у мастера, но многие женщины учатся и наращивают реснички самостоятельно.

Преимущества

К преимуществам этой процедуры можно отнести следующее:

  • выразительность глаз;
  • можно применить различный декор, это могут быть цветные волоски или приклеивание страз и перьев;
  • комфорт;
  • ресницы остаются естественного вида, нет эффекта накладных.

Когда родные реснички очень тонкие или ослабленные тогда наращивать можно только в уголках.

Виды наращивания ресниц с объемом 2д

Существует несколько техник, и в зависимости от того какая техника будет применена зависит продолжительность носки.

Японская. Предполагает использование качественных материалов, это могут быть искусственные или натуральные – такие реснички более мягкие и легкие, носятся более длительный период и не требуют особо щепетильного ухода. Техника предполагает приклеивание ресничек по одной, это делает процесс более долгим и требует особого мастерства. Коррекция требуется от одного раза в месяц, но в целом вид ресниц остаётся обворожительными порядка трех месяцев.

Пучковая. Данный вид наращивания более простой т. к. для достижения нужного результата приклеиваются готовые пучки из двух ресничек. При соблюдении правил по уходу эффект держится в течение месяца, в случае выпадения одного образуется сразу пробел, который нужно поправлять коррекцией.

Возможные эффекты

Изначально необходимо определиться с тем что, какой нужен результат:

  • наращивание в уголках глаз;
  • круговое;
  • частичное.

В зависимости от выбранного, можно получить следующие эффекты:

  • при выборе одинаковой длины по всей линии роста выходит классический вариант;
  • для эффекта «кукольного» взгляда используются одинаково длинные реснички;
  • по линии роста наклеиваются реснички одинаковой длины, к внешнему уголку клеятся несколько длинных, этот эффект называется беличий;
  • в случае применения разноцветных, и декоративных элементы, называется фантазийным.

Правила при нарощенных ресницах

Так как они дают дополнительную нагрузку на глаза, и родные реснички существуют правила, которые необходимо соблюдать:

  • первые сутки нельзя контактировать с водой;
  • не стоит спать, уткнувшись лицом в подушку, т.к. при этом реснички могут сильно помяться и внешний вид испортится;
  • нельзя использовать жирные косметические средства;
  • не тереть глаза и веки;
  • для поддержания ресниц в порядке необходимо во время посещать мастера и делать коррекцию;
  • нельзя пользоваться щипцами для завивки.

У данной процедуры существуют и противопоказания:

  • ослабленные родные реснички;
  • склонность к аллергии;
  • заболевания глаз;
  • ношение линз.

Как наращивать самостоятельно ресницы

Конечно, приклеивать самой себе их не очень удобно, поэтому оно делается частичное или с удлинением в уголках глаз.

Перед тем как приступить, стоит определиться, какого результата необходимо добиться:

  • на короткий период или более длительный;
  • эффект естественности или кукольного взгляда.

Исходя от необходимого результата, покупаем нужные реснички:

  • для естественного эффекта – длина материала средняя;
  • для праздничного выхода можно сделать цветные или украшенные стразами.

Перед началом работы необходимо приготовить нужные инструменты:

  • ватные палочки и диски;
  • накладные ресницы;
  • клей или смола;
  • пинцет;
  • картонка;
  • масло подсолнечное.

Необходимо:

  • убрать волосы, чтобы не мешались;
  • смыть всю косметику с лица;
  • область вокруг глаз необходимо тщательно умыть с мылом.

Технология:

  • выложить именно те реснички, которые непременно будут использованы;
  • на картонку капнуть немного клея;
  • пинцетом берем необходимую ресничку, макаем в клей и приклеиваем помогая второй рукой;
  • прижимаем пальцами и держим в течение пяти секунд.

В заключении предлагаю посмотреть видео, о том как самостоятельно клеить пучковые ресницы:

Первичная ресничка | Изучайте науку в Scitable

Адамс, Г. М. et al. al. Центрально-парный микротрубочковый комплекс из Chlamydomonas жгутиков: полипептид состав, выявленный анализом мутантов . Journal of Cell Biology 91 , 69–76 (1981).

Badano, J. L. et al. al. Цилиопатии: An новый класс генетических нарушений человека. Годовой обзор Геномика и генетика человека 7 , 125–148 (2006).

Эйнштейн, Э. Б. и др. al. Передача сигналов соматостатина в реснички нейронов имеют решающее значение для памяти распознавания объектов. Журнал неврологии 30 , 4306–4314 (2010).

Флигауф М., Бенцинг Т. и Омран Х. Когда реснички портятся: дефекты ресничек и цилиопатии. Обзоры природы Молекулярная клеточная биология 8 , 880–893 (2007) DOI: 10.1038 / nrm2278.

Hildebrandt, F. & Otto, E. Реснички и центросомы: объединяющая патогенетическая концепция кистозной болезни почек? Nature Reviews Genetics 6 , 928-940 (2005) DOI: 10.1038 / nrg1727.

Jin, H. et al. консервативные белки синдрома Барде-Бидла собирают оболочку, которая движется через мембрану белки к ресничкам. Ячейка 141 , 1208–1219 (2010) DOI: 10.1016 / j.cell.2010.05.015.

Kowalevsky, A .. Entwickelungsgeschichte des Amphioxus lanceolatus . Мемуары de l'Academie Imperiale des Sciences de Saint-Petersbourg VII 11 , 1–17 (1867.

Козьминский, К.Г., Джонсон, К. А., Форшер, П., Дж. Л. Розенбаум, J. L. 1993. Подвижность в жгутике эукариот, не связанная с жгутиком. Избиение. Труды Национального Академия наук 90, 5519–5523 (1993).

Luck, D. J. L. Генетические и биохимические рассечение жгутика эукариот. Журнал of Cell Biology 98 , 989–994 (1984).

Пазур, Г. Дж., Дикерт, Б. Л., Вучица, Ю., Сили, Э. С., Розенбаум, Дж. Л., Витман, Г.B., & Cole, D. G. Chlamydomonas IFT88 и его мышиный гомолог, ген поликистозной болезни почек Tg737 , являются необходим для сборки ресничек и жгутиков. Журнал клеточной биологии 151 , 709–718 (2000).

Маршалл, В. Ф. Клеточная биологическая основа цилиарной болезни. Журнал клеточной биологии 180 , 17–21 (2008).

Сатир, П., Педерсен, Л. Б., & Кристенсен, С. Т. Первичная ресничка с первого взгляда. Journal of Cell Science 123, 499–503 (2010).

Сили, Э. С. и Начуры, М.В. Многолетняя органелла: сборка и разборка первичной реснички. Журнал наук о клетке 123 , 511–518 (2010).

Schliwa, M. & Woehlke, G. Молекулярные двигатели. Nature 422 , 759–765 (2003).

Silflow, C. D. & Lefebvre, P. A. Сборка подвижность ресничек и жгутиков эукариот. Физиология растений 127 , 1500–1507 (2001).

Wilson, P. D. Поликистоз заболевание почек. Новое Англия Журнал Медицина 350 , 151–164 (2004).

Первичная дискинезия ресничек: MedlinePlus Genetics

Первичная дискинезия ресничек - это заболевание, характеризующееся хроническими инфекциями дыхательных путей, неправильным расположением внутренних органов и невозможностью иметь детей (бесплодие). Признаки и симптомы этого состояния вызваны аномальными ресничками и жгутиками.Реснички - это микроскопические пальцеобразные выступы, которые выступают из поверхности клеток. Они находятся в слизистой оболочке дыхательных путей, репродуктивной системы и других органов и тканей. Жгутики представляют собой хвостовые структуры, похожие на реснички, которые продвигают сперматозоиды вперед.

В дыхательных путях реснички скоординированно движутся вперед и назад, перемещая слизь в направлении глотки. Это движение слизи помогает удалить жидкость, бактерии и частицы из легких. Большинство детей с первичной цилиарной дискинезией испытывают проблемы с дыханием при рождении, что говорит о том, что реснички играют важную роль в выводе фетальной жидкости из легких.Начиная с раннего детства, у больных часто развиваются инфекции дыхательных путей. Без правильно функционирующих ресничек в дыхательных путях бактерии остаются в дыхательных путях и вызывают инфекцию. Люди с первичной цилиарной дискинезией также имеют круглогодичную заложенность носа и хронический кашель. Хронические инфекции дыхательных путей могут привести к состоянию, называемому бронхоэктазией, которое повреждает проходы, называемые бронхами, ведущие от дыхательного горла к легким, и может вызвать опасные для жизни проблемы с дыханием.

Некоторые люди с первичной цилиарной дискинезией имеют неправильное расположение органов в груди и животе. Эти аномалии возникают на ранних этапах эмбрионального развития, когда устанавливаются различия между левой и правой сторонами тела. Около 50 процентов людей с первичной цилиарной дискинезией имеют зеркальное отражение внутренних органов (situs inversus totalis). Например, у этих людей сердце находится с правой стороны тела, а не с левой.Situs inversus totalis не вызывает видимых проблем со здоровьем. Когда у человека с первичной цилиарной дискинезией возникает situs inversus totalis, часто говорят, что у него синдром Картагенера.

Примерно 12 процентов людей с первичной цилиарной дискинезией имеют состояние, известное как синдром гетеротаксии или situs ambiguus, которое характеризуется аномалиями сердца, печени, кишечника или селезенки. Эти органы могут быть структурно ненормальными или неправильно расположены. Кроме того, у пораженных людей может отсутствовать селезенка (аспления) или быть множественными селезенками (полиспления).Синдром гетеротаксии возникает из-за проблем с установлением левой и правой сторон тела во время эмбрионального развития. Тяжесть гетеротаксии широко варьируется среди пораженных людей.

Первичная дискинезия ресничек также может привести к бесплодию. Энергичные движения жгутиков необходимы для продвижения сперматозоидов к женской яйцеклетке. Поскольку их сперматозоиды не двигаются должным образом, мужчины с первичной цилиарной дискинезией обычно не могут иметь детей. Бесплодие возникает у некоторых пораженных женщин и, вероятно, связано с аномальными ресничками в маточных трубах.

Еще одним признаком первичной цилиарной дискинезии являются рецидивирующие инфекции уха (средний отит), особенно у детей раннего возраста. При отсутствии лечения средний отит может привести к необратимой потере слуха. Инфекции уха, вероятно, связаны с аномальными ресничками во внутреннем ухе.

Редко у людей с первичной цилиарной дискинезией наблюдается накопление жидкости в головном мозге (гидроцефалия), вероятно, из-за аномальных ресничек головного мозга.

Прямое измерение диффузии в обонятельных ресничках с использованием модифицированного подхода FRAP

Abstract

Коэффициент диффузии флуоресцеина в отслоившихся ресничках обонятельных рецепторных нейронов Xenopus laevis был измерен с помощью пространственно-разрешенной FRAP, где краситель вдоль половины длины ресничек подвергался фотообесцвечиванию и регистрировалось его пространственно-временное перераспределение флуоресценции.Подгонка одномерного численного моделирования диффузии и фотообесцвечивания для 35 ресничек привела к среднему значению коэффициента диффузии и, таким образом, к снижению в раз по сравнению со свободной диффузией в водном растворе.

Образец цитирования: Алевра М., Шварц П., Шильд Д. (2012) Прямое измерение диффузии в обонятельных ресничках с использованием модифицированного подхода FRAP. PLoS ONE 7 (7): e39628. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0039628

Редактор: Йорг Ланговски, Немецкий центр исследования рака, Германия

Поступила: 5 марта 2012 г .; Одобрена: 29 мая 2012 г .; Опубликовано: 10 июля 2012 г.

Авторские права: © 2012 Alevra et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Эта работа была поддержана грантами Исследовательского центра молекулярной физиологии мозга Deutsche Forschungsgemeinschaft (CMPB, http://cmpb.de/) DS и MA, а также Cluster of Excellence 171 (http : //www.dfg.de/en/research_funding/programmes/list/projectdetails/index.jsp? id = 32501626) в DS. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Введение

Многие сенсорные стимулы обнаруживаются в ресничках сенсорных клеток. Пахучие лиганды, например, преобразуются в генераторные токи в ресничках обонятельных сенсорных клеток, которые могут служить прототипом сенсорных ресничек.Поскольку некоторые из лежащих в основе процессов ограничены диффузией, любая количественная модель трансдукции потребует, среди прочего, знания о том, до какой степени диффузия замедляется в обонятельных ресничках. Общеизвестно, что диффузия в дендритах нейронов неизотропна и медленнее, чем в соматах [1]. Размер обонятельных ресничек, имеющих диаметры, по крайней мере, в пять раз тоньше, чем дендриты (200-250 нм [2], [3]), вместе с множеством структурных и функциональных белков ресничек указывает на дальнейшее снижение диффузии в обонятельных ресничках.Измерения коэффициента диффузии в сперматозоидах [4] и в ресничках сенсорных клеток сетчатки [5] согласуются с этим предположением, но в то же время показывают, что диффузия варьируется между разными типами ресничек.

Обычно коэффициент диффузии определенного вида молекул измеряют либо путем наблюдения за восстановлением флуоресценции после фотообесцвечивания (FRAP), либо с помощью флуоресцентной корреляционной спектроскопии (FCS) [6]. Однако в случае крошечных, слегка изогнутых и длинных отделов, таких как реснички, оба метода имеют свои ограничения.Они требуют либо стабильного, изотропного объема FRAP без границ, либо, в случае FCS, точного знания геометрии всех диффузионных барьеров для применения соответствующей модели с правильными параметрами [7]. Как следствие, стандартные FRAP или FCS не позволяют измерить коэффициенты диффузии в ресничках, и, соответственно, почти нет опубликованных значений для сенсорных ресничек. Единственное сообщение об обонятельных ресничках является косвенным, поскольку в нем используется цАМФ в качестве тестовой молекулы и цАМФ-управляемые токи в качестве считываемых данных [8].Это доказательство, однако, оспаривается, поскольку цАМФ разлагается при диффузии [9], и эта реакция может варьироваться в разных экспериментальных условиях, тем самым влияя. Чтобы избежать последней проблемы, в нашем исследовании мы использовали инертный флуорофор схожей молекулярной массы (флуоресцеин; цАМФ).

Что касается необходимого уточнения измерений FRAP в ресничках, моделирование методом Монте-Карло диффузии в митохондриях и эндоплазматическом ретикулуме показало, что было бы «полезно измерить временной ход флуоресценции после фотообесцвечивания не только в объеме отбеливателя, но и в одной или нескольких точках. вдали от отбеливателя »[10].

Здесь мы представляем модифицированный подход FRAP в этих направлениях с использованием конфокального, быстрого сканирования, микроскопа с линейным освещением [11], где мы сначала обесцвечиваем флуоресцеин в одной половине реснички, а затем наблюдаем перераспределение флуорофоров во всей ресничке. Модель диффузии, описывающая пространственно-временную эволюцию флуоресценции ресничек в таких условиях, затем используется для получения коэффициента диффузии, без необходимости знать диффузионные барьеры, перпендикулярные оси ресничек.

Результаты и обсуждение

Для изучения динамики флуоресценции обонятельных ресничек мы окрашивали реснички флуоресцеином, используя его нефлуоресцентную мембранопроницаемую форму диацетата флуоресцеина, который после поглощения внутриклеточными эстеразами расщепляется с образованием флуоресцеина. Реснички отделяли от клеток по модифицированному протоколу шока (см. «Методы») и помещали на покровное стекло, покрытое поли-L-лизином (рис. 1). В контрольных условиях интенсивности флуоресценции внутри реснички, отображенные в одном измерении, были в основном постоянными по пикселям, за исключением некоторых постоянных отклонений из-за специфичных для пикселей смещений ПЗС-чипа.

Рисунок 1. Подготовка обонятельных ресничек.

(A – D) СЭМ-микрофотографии, (A) вид сверху на ноздри головастика Xenopus laevis, (B) одна ноздря, внизу которой видна лужайка сенсорных клил (C, D), ( E) отделенные реснички (стрелки) на покровном стекле, покрытом поли-L-лизином, изображение получено 100-кратным объективом с использованием DIC.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0039628.g001

Мы исследовали диффузию внутри обонятельных ресничек с помощью конфокального микроскопа с линейным освещением [11], где дифракционно-ограниченная линия (параллельная x-направлению ) был отклонен в направлении оси y с использованием протокола трехфазного сканирования FRAP (рис.2А). На этапе 1 четыре изображения были сделаны со скоростью 325 кадров в секунду, чтобы определить внутрицилиндровую флуоресценцию в начале эксперимента (контроль, рис. 2В). Показанная ресничка была покрыта 64 строками, каждая из которых содержала 512 пикселей в направлении x. На этапе 2 (фаза обесцвечивания) нижняя половина объекта (32 строки) сканировалась со скоростью 488 к / с (64 кадра, серая область на рис. 2A), субизображения C и D показывают примеры кадров в начале и конец фазы отбеливания. Поскольку верхняя половина реснички (черная) не освещалась в фазе 2, она не была ни обесцвечена, ни записана.В фазе 3 (фаза восстановления) релаксация флуоресценции в ресничках визуализировалась с низкой частотой кадров (28 f / s, субизображения E – G).

Конфокальные 2D данные ресничек были впоследствии уменьшены до одного измерения с использованием шаблонов, индивидуально генерируемых из максимальной интенсивности пикселей, как показано на Fig. 2H. Результирующие нормализованные интенсивности (с замаскированной необработанной интенсивностью флуоресценции во время, максимумом, спроецированным в направлении x, и начальным временем кадра) показаны на рис. 2I, где начальные интенсивности (синий цвет) равномерно распределены по y.Зеленая кривая соответствует не полностью обесцвеченной ресничке (нижняя часть, диапазон [-30,0]). Это распределение показывает все более высокие интенсивности по направлению к центру (диапазон [-10,0]) из-за диффузии молекул красителя из неотбеленной половины в нижнюю половину реснички, что приводит к частичному восполнению. Красная и голубая кривые представляют интенсивности флуоресценции вдоль ресничек в начале и в середине фазы восстановления, соответственно, когда молекулы красителя диффундируют из верхней половины в нижнюю, медленно обесцвечиваясь.Аналогичные данные были получены от 35 ресничек.

Рис. 2. Протокол сканирования FRAP и образцы данных.

(A) Схема протокола трехфазного сканирования, показывающая положение линии освещения в пиксельных координатах. На первом этапе снимается несколько полных кадров для определения начальной флуоресценции. На второй фазе получаются полукадры с высокой частотой кадров (488 к / с) для фотообесцвечивания нижней половины реснички. Третья фаза регистрирует перераспределение флуоресценции из-за диффузии с низкой частотой кадров (28 к / с).Получение изображения (синий) задерживается по отношению к сигналу положения зеркала (зеленый) для линейности отклика зеркала. Ось времени не масштабирована, количество изображений уменьшено для простоты. (B – H) Кадры образцов из всех фаз FRAP показывают эволюцию распределения флуоресценции, масштабная линейка 5, время кадра относительно первого кадра. (B) Начальная флуоресценция. (C, D) Первый и последний полукадр фазы обесцвечивания, верхняя половина не отображается и отображается черным цветом. (E) Первый полный кадр фазы восстановления показывает неоднородное распределение флуоресценции.(F) В основном однородное распределение после 9 кадров в фазе восстановления. (G) Последний кадр фазы восстановления. (H) 2D-пиксельная маска, используемая для максимальной проекции 2D-интенсивности на 1D-позицию на ресничке. (I) Графики проецируемой интенсивности (точки) для выбранных кадров (синий: данные из кадра B, зеленый: фаза обесцвечивания (t = 51 мс), красный: E, голубой: F) и соответствующие наилучшие соответствия (сплошные линии, для полные данные см. рис. 3В).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0039628.g002

Каждое измерение FRAP реснички дает временной стек изображений необработанных данных.Это было удобно уменьшено без какой-либо потери информации путем (i) отображения интенсивностей вдоль реснички на линию, (ii) цветового кодирования значений интенсивности и (iii) повторения процедуры для каждого необработанного изображения. В результирующем представлении процесса FRAP (Fig. 3A) каждая вертикальная линия, таким образом, соответствует профилю интенсивности вдоль реснички во время сканирования реснички. Крайняя левая вертикальная полоса (1) представляет фазу управления, состоящую из четырех строк, соседний блок (2), содержащий черный прямоугольник, показывает фазу обесцвечивания, а крайнее правое поле (3) соответствует фазе восстановления.По абсциссе указан индекс кадра. Обратите внимание, что изображения на трех этапах FRAP были сняты с разной частотой кадров. Совмещение отбеливания и пополнения молекулами красителя лучше всего видно на границе между обесцвеченной и неотбеленной половиной.

Рис. 3. Подгонка одномерной диффузионной модели к экспериментальным данным.

(A) Экспериментальные данные, представленные в виде одномерного распределения флуоресценции по номерам кадров для полного эксперимента, с нормализованной флуоресценцией (), обозначенной цветом в соответствии с цветовой картой.Фазы FRAP (см. Рис. 2A) указаны выше. (B) Соответствующие данные из наилучшего результата одномерной диффузионной модели. (C) Остатки между A и B, используя меньший диапазон цветовой карты.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0039628.g003

В качестве последнего шага нашего анализа был получен коэффициент диффузии путем моделирования динамики внутричерепной флуоресценции до, во время и после отбеливания. Затем подгонка модели к данным дает коэффициент диффузии.Численное моделирование состоит из чередования этапов обесцвечивания и диффузии с учетом пиксельных расстояний, скорректированных на угол реснички относительно линии освещения (реснички с углами более 45 градусов и перекрывающиеся реснички были исключены из оценки), а также время задержка между двумя кадрами согласно фазе FRAP. Для моделирования диффузии мы использовали одномерную дискретную формулировку закона диффузии Обратного Эйлера, то есть (1) где время (t) и пространство (y) дискретизируются как,, и,.Звездочкой () обозначены интенсивности после стадии фотообесцвечивания (как описано ниже). Поскольку реснички отслоены и закрыты (непроницаемы) на своих концах, мы предположили, что пространственные производные на двух границах равны нулю. При, указанная выше система разностных уравнений может быть записана как преобразование к, (2) с трехдиагональной матрицей, которая легко решается методом Томаса [12]. Для этапов фотообесцвечивания интенсивности освещенных областей умножались на постоянный коэффициент межкадрового фотообесцвечивания, соответствующий моноэкспоненциальному затуханию.(3)

Это достаточно точно для флуоресцеина при концентрациях ниже, чем у кислорода [13], условие, обычно соблюдаемое при комнатной температуре, где у нас есть кислород по сравнению с приблизительно флуоресцеином.

Рисунок 4. Распределение коэффициентов диффузии.

Синий: гистограмма наилучших результатов для коэффициентов диффузии флуоресцеина из 35 ресничек, со средним значением и стандартным отклонением в виде темно-серой линии и светло-серой области соответственно. Коэффициент диффузии флуоресцеина в водном растворе при 25 ° C [14] показан красным цветом, а значения, скорректированные для диапазона (23 ± 1) ° C, показаны зеленым.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0039628.g004

Смоделированное распределение флуоресценции для полного эксперимента FRAP было затем подогнано к нормализованным экспериментальным данным с использованием подгоночных параметров, константы фотообесцвечивания и смещения флуоресценции для учета для темнового тока ПЗС. Наилучшее соответствие экспериментальным данным, показанным на фиг. 3A, приведено на фиг. 3B, причем часть C фигуры показывает довольно однородно распределенные остатки. Полученный в результате параметр подгонки дал (как и известны).Значения флуоресцеина, измеренные в 35 ресничках, показаны на гистограмме на фиг. 4, среднее значение составляет.

Различие можно объяснить разными стадиями развития и различными экспериментальными условиями, особенно комнатной температурой. Для сравнения, величина свободной диффузии флуоресцеина в водном растворе при 25 ° C [14] была скорректирована до комнатной температуры наших экспериментов (23 ± 1) ° C с использованием [14]. (4) с абсолютными температурами и раствором вязкость. Таким образом, диффузия в ресничках at происходит в 3 раза медленнее.4 по сравнению с.

Материалы и методы

Заявление об этике

Головастиков Xenopus laevis охлаждали в смеси льда и воды и обезглавливали, как одобрено Комитетом по этике экспериментов на животных Геттингенского университета (ссылочный номер T24.07).

Подготовка обонятельных ресничек

Головастиков Xenopus laevis (стадия 52–54; стадия после [15]) охлаждали группами по 5 человек в смеси льда и воды и обезглавливали.Вырезали блоки ткани, содержащие обонятельную слизистую оболочку, и инкубировали в течение 40 минут в 1 мл раствора Рингера лягушки, содержащего (в мМ): 98 NaCl, 2 KCl, 1, 2 MgCl, 5 глюкозы, 5 пируват натрия, 10 HEPES, 0,01. диацетат флуоресцеина и 0,1 МК-571 при pH 7,8. Для отделения обонятельных ресничек применялся протокол кальциевого шока (модифицированный из [16] и [17]). Сначала раствор Рингера заменяли на 0,96 мл раствора («раствор А»), содержащего (в мМ): 30 ТРИС, 100 NaCl, 2 ЭДТА при pH 8.Затем концентрацию кальция увеличивали, добавляя 40 мкл раствора, содержащего 1М CaCl. Раствор выдерживали 20 минут при 4 градусах Цельсия. Отделенные реснички отделяли от блоков ткани центрифугированием при 3000 об / мин (BIOFUGE fresco, Heraeus, Бакингемшир, Англия) (осадок отбрасывали) и концентрировали центрифугированием при 13000 об / мин (супернатант отбрасывали). Осадок ресуспендировали в растворе А и наносили на предметное стекло микроскопа, покрытое поли-L-лизином.

Микроскопия с конфокальным линейным освещением

Пластинчатые реснички были визуализированы с использованием водно-иммерсионного объектива 100x (Achroplan 100x / 1,0W, Zeiss, Göttingen) и вертикального микроскопа (Axioskop 2 FS plus, Zeiss, Göttingen), к которому применялся настраиваемый блок конфокальной линии освещения. был прикреплен ([11]).Результирующий размер пикселя составил 220 нм. Каждую ресничку центрировали в режиме светлого поля и получали несколько конфокальных изображений (512 × 128 пикселей), чтобы определить ее общую длину, положение и ориентацию. Затем в автоматизированных экспериментах с FRAP мы получили стопки полнокадровых изображений (512 × 64 пикселей) и полукадров (512 × 32 пикселей).

Сканирующая электронная микроскопия

Образцы фиксировали 1,5% глутаровым альдегидом и 1,5% параформальдегидом в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, pH 7.3 в течение 3 часов при комнатной температуре и постфиксация в течение двух часов в 2% тетроксиде осмия в 0,1 натрий-фосфатном буфере. После обезвоживания в градуированном этаноле образцы для сканирующей электронной микроскопии (SEM) сушили в сушилке для критических точек (Polaron, Уотфорд, Великобритания), устанавливали на штыри и покрывали золотопалладием в холодном распылителе для нанесения покрытий (Fisons Instruments Uckfield, ВЕЛИКОБРИТАНИЯ). Образцы исследовали на сканирующем электронном микроскопе DSM 960 (Zeiss Oberkochen, Германия).

Анализ данных

Анализ данных флуоресценции был выполнен с использованием специального программного обеспечения, написанного в MATLAB (The MathWorks, Натик, Массачусетс), с критическим по времени компонентом моделирования диффузии, написанным на C (адаптировано из [12]).

Благодарности

Эта работа была поддержана Исследовательским центром молекулярной физиологии мозга DFG (CMPB) и Excellence Cluster 171.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: MA DS. Выполнял опыты: М.А. Проанализированы данные: MA. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: MA. Написал статью: DS MA. Подготовка образцов SEM и визуализация: PS.

Ссылки

  1. 1. Gennerich A, Schild D (2002) Анизотропная диффузия в дендритах митральных клеток, выявленная с помощью флюоресцентной корреляционной спектроскопии.Biophys J 83: 510–522.
  2. 2. Hansen A, Reiss JO, Gentry CL, Burd GD (1998) Ультраструктура обонятельного органа у когтистой лягушки, xenopus laevis, во время личиночного развития и метаморфоза. J Comp Neurol 398: 273–288.
  3. 3. Kleene SJ, Gesteland RC, Bryant SH (1994) Электрофизиологическое исследование обонятельных ресничек лягушки. J Exp Biol 195: 307–328.
  4. 4. Такао Д., Камимура С. (2008) Frap-анализ молекулярной диффузии внутри сперматозоидов морского ежа.J Exp Biol 211: 3594–3600.
  5. 5. Calvert PD, Schiesser WE, Pugh EN (2010) Диффузия растворимого белка, фотоактивируемого gfp, через сенсорную ресничку. J Gen Physiol 135: 173–196.
  6. 6. Ким С.А., Санабрия Х., Дигман М.А., Граттон Э., Швилле П. и др. (2010) Количественная оценка трансляционной мобильности в нейронах: сравнение современных оптических методов. Журнал неврологии 30: 16409–16416.
  7. 7. Gennerich A, Schild D (2000) Флуоресцентная корреляционная спектроскопия в небольших цитозольных компартментах критически зависит от используемой модели диффузии.Biophys J 79: 3294–3306.
  8. 8. Chen C, Nakamura T, Koutalos Y (1999) Коэффициент диффузии Cyclic amp в обонятельных ресничках лягушки. Biophys J 76: 2861–2867.
  9. 9. Takeuchi H, Kurahashi T (2008) Распределение, усиление и суммирование чувствительности к циклическим нуклеотидам в пределах отдельных обонятельных сенсорных ресничек. J Neurosci 28: 766–775.
  10. 10. Ольвецкий Б.П., Веркман А.С. (1998) Анализ затрудненной диффузии методом Монте-Карло в трех измерениях: приложение к молекулярной диффузии в органеллах.Biophys J 74: 2722–2730.
  11. 11. Джунек С., Чен Т.В., Алевра М., Шильд Д. (2009) Визуализация корреляции активности: визуализация функции и структуры популяций нейронов. Biophys J 96: 3801–3809.
  12. 12. Weickert J, Romeny BH, Viergever MA (1998) Эффективные и надежные схемы для нелинейной диффузионной фильтрации. IEEE Trans Image Process 7: 398–410.
  13. 13. Song L, Hennink EJ, Young IT, Tanke HJ (1995) Кинетика фотообесцвечивания уоресцеина в количественной флюоресцентной микроскопии.Biophys J 68: 2588–2600.
  14. 14. Culbertson CT, Jacobson SC, Ramsey JM (2002) Измерения коэффициента диффузии в микропроцессорных устройствах. Таланта 56: 365–373.
  15. 15. Nieuwkoop PD, Faber J, редакторы (1994) Нормальный стол Xenopus laevis (Daudin). Издательство Гарленд, 282 с.
  16. 16. Anholt RR, Aebi U, Snyder SH (1986) Частично очищенный препарат изолированных хемосенсорных ресничек из обонятельного эпителия лягушки-быка, rana catesbeiana.J Neurosci 6: 1962–1969.
  17. 17. Chen Z, Pace U, Heldman J, Shapira A, Lancet D (1986) Изолированные обонятельные реснички лягушки: препарат дендритных мембран из хемосенсорных нейронов. J Neurosci 6: 2146–2154.

Michelle Cilia: USDA ARS


Мы заинтересованы в понимании сложной взаимосвязи между вирусами, насекомыми-переносчиками и растениями-хозяевами, уделяя особое внимание вирусам, поражающим мелкие зерновые культуры. Основной упор делается на использование комбинации молекулярного, генетического и протеомного подходов для понимания того, как тля и растения регулируют процесс передачи вируса.Вторая область - это разработка новых инструментов борьбы с вредителями для усиления контроля над культурами и предоставления новых стратегий борьбы с вирусными заболеваниями растений. В нашей лаборатории мы изучаем вирусы, переносимые тлей-переносчиками.

Вирусы растений передаются насекомыми двумя разными способами. Потивирусы связываются с ротовыми частями тли и быстро передаются новым хозяевам во время кормления. Однако представители Luteoviridae перед передачей циркулируют по телам своих тлей-переносчиков.Последний механизм называется циркуляционной передачей и основан на серии регулируемых во времени и пространстве белковых взаимодействий внутри тела тли и во флоэме растений-хозяев. Мы применяем множество современных технологий, включая масс-спектрометрию, высокопроизводительное секвенирование ДНК / РНК, конфокальную микроскопию, молекулярную генетику и двухмерный флуоресцентный гель-электрофорез для изучения передачи вируса растений тлей.

Некоторые белки, участвующие в передаче вирусов тлями, имеют практическое применение, поскольку они служат надежными биомаркерами для идентификации популяций тлей, которые могут эффективно передавать вирусы.Эти белки являются первыми биомаркерами компетенции вектора для передачи патогенов. Эта работа открывает дверь к новым вирусам и комплексным стратегиям борьбы с вредителями, позволяя полностью модернизировать методы борьбы с сельскохозяйственными вредителями. Используя масс-спектрометрию, мы разрабатываем целевые методы для количественного определения пептидов, которые позволяют различать эффективные и бедные популяции насекомых-переносчиков. Мы сотрудничаем с учеными Вашингтонского университета в Сиэтле и Международного института тропического сельского хозяйства в Африке, чтобы превратить эти методы в полезный инструмент для борьбы с вирусными заболеваниями и профилактики основных продовольственных культур в Африке и других странах мира.

Публикации

Реснички M , Peter K, Bereman M, Howe K, Fish T, Smith D, Gildow F, MacCoss MJ, Thannhauser T, and Gray S (2012) Discovery и целенаправленная ЖХ-МС / МС очищенного полеровируса выявляет различия во взаимодействии вируса с хозяином, связанные с измененной передачей тлей. PLoS One, принято с небольшими исправлениями.

Chavez JD *, Cilia M *, Weisbrod CR, Ju HJ, Eng JK, Gray SM и Bruce JE (2012) Измерения перекрестного связывания вируса скручивания листьев картофеля выявляют топологии взаимодействия белков, необходимые для стабильности вириона, передачи тли и взаимодействия вируса с растением.J. Proteome Res. 11: 2968-2981. * Соавторы.

Cilia, M , Bereman, M, Fish, T, MacCoss, M, and Gray, S. (2012) Векторные биомаркеры гомоптерановых для циркулирующей передачи вируса растений экспрессируются у нескольких видов тлей и белокрылки Bemisia tabaci. Журнал интегративного сельского хозяйства, специальный выпуск: комплекс видов белокрылки Bemisia tabaci и бегомовирусы, 11 (2): 249-262.

Реснички, М , Хау, К, Фиш, Т, Смит, Д, Махони, Дж, Тамбориндеги, Ц, Бурд, Дж, Таннхаузер, Т и Грей, С.(2011) Открытие биомаркеров сверху вниз: белковые биомаркеры для эффективной передачи вируса насекомыми (Homoptera: Aphididae), обнаруженные путем сочетания генетики и 2-D DIGE, Proteomics, 11: 2440-58 [на обложке выпуска].

Реснички, M , Tamborindeguy, C, Fish, T, Howe, K, Thannhauser, T and Gray, S. (2011) Генетика в сочетании с количественной интактной протеомикой связывает наследственную экспрессию белков тли и эндосимбионтов с циркулирующей передачей полеровирусов. J. Virology 85: 2148-2166 [на обложке выпуска]

Реснички, M , Tamborindeguy, C, Rolland, M, Howe, K, Thannhauser, T.и Gray, S. (2011) Ощутимые преимущества секвенирования и аннотации генома гороховой тли для протеомики тли: улучшение идентификации белков и проверка данных для протеомики на основе гомологии. J. Физиология насекомых, 57: 179-190.

Реснички, M , Fish, T, Yang, X, McLaughlin, M, Thannhauser, TW и Gray, S (2009) Сравнение методов экстракции белков, подходящих для протеомных исследований белков тли на основе геля. J Biomol Tech 20: 201-15.

Benitez-Alfonso, Y, Реснички, M , San Roman, A, Thomas, C, Maule, A, Hearn, S. и Jackson, D (2009) Контроль развития меристемы Arabidopsis посредством тиоредоксин-зависимой регуляции межклеточный транспорт.Proc Natl Acad Sci U S A 106: 3615-20.

Cilia, M (2009) На пути к поддержке женщин через критические переходные моменты в научной карьере: резюме семинара. J Biomol Techniques 19: 353-55.

Реснички, ML и Jackson, D (2004) Форма и функция плазмодесм. Curr Opin Cell Biol 16: 500-6.

Cilia, M , Cantrill, L и van Bel, A. (2002) Plasmodesmata 2001: На сафари через симпласт. Растительная клетка 14: 7-10.

Kim, JY, Yuan, Z, Cilia, M , Khalfan-Jagani, Z и Jackson, D (2002) Межклеточный трафик слияния зеленого флуоресцентного белка KNOTTED1 в меристеме листа и побега Arabidopsis .Proc Natl Acad Sci U S A 99: 4103-8.

Первичная цилиарная дискинезия - NORD (Национальная организация редких заболеваний)

УЧЕБНИКИ
Бартолони Л. Первичная цилиарная дискинезия. В: Руководство NORD по редким заболеваниям, Филадельфия, Пенсильвания: Липпинкотт, Уильямс и Уилкинс; 2003: 675.

СТАТЬИ В ЖУРНАЛЕ
Boon M, Vermeulen FL, Gysemans W, et al. Корреляция структуры и функции легких у пациентов с первичной цилиарной дискинезией, Торакс, 2015; 70: 339-45.

Lobo J, Zariwala MA, Noone PG Первичная цилиарная дискинезия.Semin Respir Crit Care Med. 2015; 36: 169-79.

Вернер C, Оннебринк JG, Омран H Диагностика и лечение первичной цилиарной дискинезии. Реснички 2015; 4: 2

Lucas JS, Burgess A, Mitchison HM, et al. Диагностика и лечение первичной цилиарной дискинезии. Arch Dis Child. 2014; 99: 850-6.

Лукас Дж.Л., Ли М.В. Диагностика первичной цилиарной дискинезии: в поисках золотого стандарта. Eur Respir. 2014; Дж. 44: 1418-22.

Шапиро А.Дж., Дэвис С.Д., Ферколь Т.Ф. и др. Латеральные дефекты, отличные от situs inversus totalis, при первичной цилиарной дискинезии: понимание situs ambiguus и гетеротаксии.Сундук 2014; 146: 1176-86.

Ноулз М.Р., Дэниэлс Л.А., Дэвис С.Д. и др. Первичная цилиарная дискинезия: последние достижения в диагностике, генетике и характеристике клинических заболеваний. Am J Respir Crit Care Med. 2013; 188: 913-22.

Leigh MW, Hazucha MJ, Chawla KK, et al. Стандартизация назального измерения оксида азота как теста на первичную цилиарную дискинезию. Энн Ам Торак Соц 2013; 10: 574-81.

Leigh MW, Pittman JE, Carson JL, et al. Клинико-генетические аспекты первичной цилиарной дискинезии / синдрома Картагенера.Genet Med. 2009; 11 (7): 473-87.

Кеннеди М.П., ​​Омран Х., Ли М.В. и др. Врожденный порок сердца и другие гетеротаксические дефекты в большой группе пациентов с первичной цилиарной дискинезией. Тираж. 2007; 115 (22): 2814-21.

Заривала М.А., Ноулз М.Р., Омран Х. Генетические дефекты в структуре и функции ресничек. Энн Рев Физиол. 2007; 69: 423-450.

Брюкнер М. Гетеротаксия, врожденные пороки сердца и первичная цилиарная дискинезия. Тираж. 2007; 115 (22): 2793-5.

Badano JL, Mitsuma N, Beales PL и др.Цилиопатии: новый класс генетических заболеваний человека. Анну Рев Геномис Хум Генет. 2006; 7: 125-148.

Van’s Gravesande KS, Omran H. Первичная цилиарная дискинезия: клинические проявления, диагностика и генетика. Ann Med. 2005; 37: 439-49.

Карлен Б., Стенрам У. Первичная цилиарная дискинезия: обзор. Ultrastruct Pathol. 2005; 29: 217-20.

Noone PG Leigh MW Sannuti A, et al. Первичная цилиарная дискинезия: диагностические и фенотипические особенности. Am J Respir Crit Care Med. 2004; 169: 459-67.

Афзелиус Б.А. Заболевания, связанные с ресничками. J Pathol. 2004; 204: 470-7.

ИНТЕРНЕТ
Заривала М.А., Ноулз М.Р., Ли М.В. Первичная цилиарная дискинезия. 24 января 2007 г. [Обновлено 28 февраля 2013 г.]. В: Pagon RA, Adam MP, Ardinger HH, et al., Редакторы. GeneReviews [Интернет]. Сиэтл (Вашингтон): Вашингтонский университет, Сиэтл; 1993-2015 гг. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1122/ Доступно 19 мая 2015 г.

Первичные реснички имеют длину персистентности, зависящую от длины

Культура эпителиальных клеток

Наши экспериментальные протоколы для рост, поддержание и фармакологические манипуляции с мерцательными эпителиальными клетками были опубликованы в других источниках (Resnick 2015, 2016; Glaser et al.{\ circ} \ hbox {C} \) и позволили дифференцироваться в течение 72 часов перед отловом. Условия дифференцировки устанавливали путем снижения концентрации фетальной телячьей сыворотки (FBS) с 10 до 1,5%. Затем монослой сливающейся эпителиальной ткани помещали в камеру для инкубации образцов под микроскопом с контролируемой температурой (Solent Scientific) для визуализации и улавливания.

Оптический захват

Наши экспериментальные протоколы по оптическому захвату ресничек были опубликованы в другом месте (Resnick 2015, 2016; Glaser et al.{\ circ} \ hbox {C} \). Мы использовали вертикальный микроскоп Leica DM6000B для получения изображений и захвата ресничек. Объектив микроскопа, использованный для экспериментов, представлял собой погружающийся объектив 63X NA 0,90, предназначенный для непосредственного погружения в культуральную среду. Эта геометрия захвата известна как однолучевая градиентная ловушка, поскольку одного луча достаточно, чтобы удерживать захваченный объект во всех трех измерениях. Захватывающий лазер представлял собой одномодовый Nd: YAG непрерывный лазер с диодной накачкой мощностью 0,5 Вт (CrystaLaser CL1047-500), ориентированный по оптической оси микроскопа с использованием 5 степеней свободы (ось x , y ). оси, z оси, тангажа и рыскания).Лазерный луч расширялся, чтобы заполнить заднюю апертуру линзы объектива, и входил в микроскоп через боковой порт на турели флуоресцентного куба. Боковое дихроичное зеркало (Chroma) направляло захватывающий луч вниз на образец, а использование дихроичного зеркала позволяло беспрепятственно, одновременно наблюдать захваченные реснички в светлопольном изображении. Для нашей ловушки перетяжка луча составляет 0,3 \ (\ upmu \) м, а длина Рэлея - 0,4 \ (\ upmu \) м. Улавливающий свет, рассеянный вперед, регистрировался квадрантным фотодиодом (QPD).Положение кончика ресничек было измерено QPD и получено в цифровом виде с помощью специальной процедуры LabVIEW с частотой 50 кГц.

Захват ресничек

Культивированный монослой клеток помещали в держатель образца микроскопа для улавливания. Сначала культуру трижды промывали DMEM для удаления плавающих клеточных остатков, которые могли попасть в ловушку, и среду заменяли DMEM с HEPES-буфером (pH 7,46) без фенолового красного, которая флуоресцирует под захватывающим лучом.

Хотя мы утилизировали клеточные культуры после измерений в ловушках, эти культуры хорошо переносят условия улавливания. Улавливающий луч, по-видимому, не повреждает наши клетки (Leitz et al. 2002; Neuman et al. 1999). Культуры обычно выживают несколько часов и восстанавливаются, если DMEM заменяется питательной средой и культуры возвращаются в инкубатор.

Схематическое и репрезентативное изображение оптически захваченной первичной реснички показано на рис. 1. Ресничка выступает над телом клетки, оставляя клетки не в фокусе.Как видно на вставке, ресничка выглядит как точка в фокусе на размытом фоне.

Рис. 1

Схематическое изображение и врезанное изображение оптически захваченной первичной реснички. Расположение оптической ловушки обозначено кружком. Реснички выступают над телом клетки и поэтому выглядят как точка на микроскопическом изображении.

При выключенной ловушке ресничные клетки были локализованы с использованием изображений в светлом поле. Длину реснички измеряли оптически путем регистрации расстояния z , необходимого для перемещения предметной плоскости в фокусе от базального конца к дистальному концу, и двух изображений, полученных для измерения проецируемого расстояния « r » между базальным прикреплением. и дистальный кончик.2} \), см. Рис. 2. Местоположение ловушки в поле зрения было предварительно обнаружено на этапе калибровки, дистальный кончик реснички был перемещен в место ловушки. Затем включали ловушку и собирали данные QPD со скоростью 50 тыс. Отсчетов / с в течение нескольких десятков секунд. Поскольку ловушка применяется только к кончику реснички, а реснички нерастяжимы, приложенная сила захвата не меняется с длиной реснички. Более того, поскольку захваченная ресничка наблюдается одновременно со светлопольным освещением, мы исключаем случай захвата изогнутой или иным образом деформированной реснички.j \ right) \) считается «необработанными данными». Затем необработанные данные временного ряда обрабатываются для расчета среднеквадратичного смещения (MSD) дистального кончика, см. Рис. 3. Разброс, расположенный в областях \ (t = 0,008 \) с и 0,017 с (400 и 800 timesteps соответственно) является артефактом. Как мы показываем, длина реснички и асимптотическое значение MSD достаточны, чтобы охарактеризовать механическую реакцию реснички в терминах постоянной упругости пурпурного цвета \ (k _ {\ mathrm {cilium}} \).

Рис. 3

Пример подмножества данных, полученных QPD, представленных в виде положения (слева) и рассчитанного MSD (справа). В напряжение

Хороший обзор различных методов анализа оптических ловушек можно найти в Jones et al. (2015). Наш метод анализа вычисляет MSD и соответствует аналитической функции (представленной ниже) для определения долгосрочного асимптотического значения MSD, обозначенного «\ ({\ hbox {MSD}} _ {\ infty} \)». Анализ на основе \ ({\ hbox {MSD}} _ {\ infty} \) предпочтителен по двум причинам. Во-первых, дискретизация сигнала QPD не приводит к ложным результатам (Norrelykke and Flyvbjerg 2011). Во-вторых, не требуется точное знание вязкого демпфирования, которое проблематично, поскольку наш захваченный объект представляет собой тонкий цилиндр, а не шар.{\ mathrm {2D}} \).

Структурная модель первичной реснички

Следуя (Schwartz et al. 1997; Young et al. 2012; Downs et al. 2014; Resnick 2015), мы сначала смоделировали ресничку как однородную консольную балку длиной ' L 'подвержены внешней нагрузке. Эта модель «тяжелой эластики» для первичной реснички рассматривает структуру как однородную изотропную гибкую цилиндрическую балку с полусферическим концом, ограниченную на базальном конце и свободную перемещаться на дистальном конце.Эта модель использовалась для самых разных систем, включая нитевидные биополимеры (Wiggins et al. 1998), наконечники атомно-силовых микроскопов (Sader 1998) и клеточные выступы, включая жгутики (Lighthill, 1976), стереоцилии (Svrcek-Seiler et al. 1998), гликокаликс (Weinbaum et al. 2003) и актиновая щеточная кайма (Guo et al. 2000).

Поскольку первичные реснички, в отличие от жгутиков или подвижных ресничек, не генерируют активно внутренние силы, мы можем моделировать первичные реснички как пассивную эластичную балку: внутри пучка нет сил и / или моментов.Поскольку стройность (длина / диаметр) реснички велика, мы также можем пренебречь как инерцией вращения, так и поперечным сдвигом и приблизительно описать форму аксонемы ресничек в терминах одномерного объекта, так называемой нейтральной оси (Mickey 1995). .

В разделе «Приложение», Мы представляем два варианта модели тяжелой эластики: «классический» кантилевер и «обобщенный» кантилевер. По сравнению с классической моделью, у обобщенного кантилевера больше степеней свободы на фиксированном конце. {- 3} \).Наши данные (см. Рис. 4) подтверждают, что реснички механически не ведут себя как простые консольные балки.

Рис. 4

Расчетные значения кажущейся жесткости пружины (слева) и асимптотических значений MSD захваченного кончика реснички (справа) в зависимости от длины реснички для необработанных ресничек

Стохастическая модель оптически захваченной реснички

Применение установка оптической ловушки на консольный пучок вносит как минимум две сложности по сравнению с захваченной свободной частицей.Во-первых, гидродинамические (вязкие) силы действуют по всей длине кантилевера, а не только на захваченном конце. Во-вторых, хотя дистальный конец кантилевера может «свободно» реагировать на приложенную силу захвата, ограниченный конец вводит восстанавливающую силу, воплощенную постоянной пружиной реснички \ (k _ {\ mathrm {cilium}} \). Обозначим расстояние от оси несогнутой реснички до оси ловушки как « d ».

Сначала мы рассмотрим упрощенную модель захваченной реснички - аксонема подвержена действию вязких сил и ведет себя как сверхзатухающая система, но коэффициент вязкого демпфирования \ (\ gamma \) остается неопределенным.Рисунок 1 представляет эту упрощенную модель первичной реснички с ловушкой, приложенной к дистальному концу.

Рассматривая одномерное движение, из рис. 1 мы имеем модифицированное уравнение типа Ланжевена:

$$ \ begin {align} m {\ ddot {r}} \ left (t \ right) = F _ {\ mathrm { trap}} + F _ {\ mathrm {cilium}} - \ gamma \ dot {r} \ left (t \ right) + \ sqrt {2k _ {\ mathrm {B}} T \ gamma} \, \ zeta \ left ( t \ right) \ end {align} $$

(4)

где \ (F _ {\ mathrm {trap}} = - k _ {\ mathrm {trap}} r \), \ (F _ {\ mathrm {cilium}} = -k _ {\ mathrm {cilium}} \ left ( d + r \ right) \), м - масса, а \ (\ gamma \) - коэффициент демпфирования.\ (\ zeta (t) \) - это нормализованный процесс белого шума, \ (k _ {\ mathrm {B}} \) - постоянная Больцмана, а T - температура.

Переставляя, мы получаем наше уравнение движения:

$$ \ begin {выровнено} & m {\ ddot {r}} \ left (t \ right) + \ gamma \ dot {r} \ left (t \ right) + \ left (k _ {\ mathrm {trap}} + k _ {\ mathrm {cilium}} \ right) r \ left (t \ right) + k _ {\ mathrm {cilium}} \, d \ nonumber \\ & \ quad = \ sqrt {2k _ {\ mathrm {B}} T \ gamma} \, \ zeta \ left (t \ right). 3} \ right].{\ text {2D}} _ {\ infty} \ Equiv \ frac {4k _ {\ mathrm {B}} T} {k _ {\ mathrm {eff}}} \).

Колебания базального тела

Теперь мы включаем роль динамики базального тела на движение ресничек (Battle et al. 2015) и определяем, какие изменения, если таковые имеются, происходят в уравнении. 10. Колебания базального тела происходят из-за механической связи базального тела с управляемой актином механической активностью клеточной коры. Теперь мы выводим упрощенную аналитическую модель для оптически захваченной реснички, включающую индуцированные флуктуации кончика реснички, вызванные активными флуктуациями базального тела.{\ text {2D}} _ {\ infty} \).

Самый простой способ включить стохастическое движение базального тела - изменить уравнение. 5:

$$ \ begin {align} & m {\ ddot {x}} \ left (t \ right) + \ gamma {\ dot {x}} \ left (t \ right) + \ left (k _ {\ mathrm {trap}} + k _ {\ mathrm {cilium}} \ right) x \ left (t \ right) \ nonumber \\ & \ quad - \, k _ {\ mathrm {cilium}} \ sqrt {\ gamma {\ mathrm {MSD}} _ {\ mathrm {bb}} / k _ {\ mathrm {bb}}} \ zeta _1 (t) = \ sqrt {2k _ {\ mathrm {B}} T \ gamma} \, \ zeta _2 \ left (t \ right) \ end {выравнивается} $$

(11)

, где мы позволили базальному телу подвергаться активным колебаниям со среднеквадратичным смещением \ (\ mathrm {MSD} _ {\ mathrm {bb}} \) с внутренней постоянной упругости \ (k _ {\ mathrm {bb} } \).{\ text {2D}} _ {\ infty}}. \ end {align} $$

(13)

Важно отметить, что поскольку \ (k _ {\ mathrm {cilium}} \) появляется в обоих терминах, а \ ({\ text {MSD}} _ {\ mathrm {bb}} \) только в одном, есть возможность независимо контролируют \ (k _ {\ mathrm {cilium}} \) и \ ({\ text {MSD}} _ {\ mathrm {bb}} \), обеспечивая множественные биохимические пути для исследования реакции цилиарного потока.

Вычислительная модель

Мы разработали крупнозернистую вычислительную модель первичной реснички для изучения деформации и флуктуаций аксонемы реснички и базального тела на основе динамики диссипативных частиц (DPD) (Peng et al.2013). DPD - это крупнозернистая молекулярная динамика, цель которой - уловить тепловые флуктуации и гидродинамическое поведение исходных атомистических систем (Groot and Warren 1997; Hoogerbrugge and Koelman 1992). Помимо несвязанных взаимодействий DPD для захвата флуктуаций и гидродинамики, мы применяем крупнозернистую грань для конструирования связанных взаимодействий в молекулярных структурах первичной реснички на основе текущего понимания ее структуры. Детали модели описаны в «Приложении».{\ circ} \ hbox {C} \). Мы обнаружили, что MSD кончика всегда увеличивается с длиной реснички, когда мы используем либо постоянную длину персистентности для микротрубочек, либо используем зависящую от длины персистентную длину из уравнения. 16. Поскольку мы моделируем базальное тело как твердое тело, описываемое уравнением Ланжевена, и моделируем остальные клеточные компоненты в рамках DPD, наша модель позволяет нам назначать разные температуры для уравнения Ланжевена (базальное тело) и гидродинамической ванны. Этот подход, использующий более высокую температуру для базального тела, моделирует управляемые актином «активные колебания» базального тела.Наша модель предсказывает, что MSD кончика уменьшается с длиной ресничек либо для постоянной, либо для зависящей от длины персистентной длины микротрубочек, что качественно согласуется с нашими экспериментальными наблюдениями.

Аудиосистема: структура и функции (Раздел 2, Глава 12) Нейронаука в Интернете: Электронный учебник для нейронаук | Кафедра нейробиологии и анатомии

12.1 Волосковая клетка позвоночных: механорецепторный механизм, концевые звенья, K + и Ca 2+ каналов

Рисунок 12.1
Механическая трансдукция в волосковых клетках.

Ключевой структурой слуховой и вестибулярной систем позвоночных является волосковая клетка . Волосковая клетка впервые появилась у рыб как часть длинного тонкого массива, расположенного по бокам тела, улавливающего движения в воде. У высших позвоночных внутренняя жидкость внутреннего уха (а не внешняя жидкость, как у рыб) омывает волосковые клетки, но эти клетки по-прежнему ощущают движения в окружающей жидкости.Несколько специализаций делают человеческие волосковые клетки чувствительными к различным формам механической стимуляции. Волосковые клетки кортиевого органа улитки уха реагируют на звук. Волосковые клетки в ампульных кристах полукружных протоков реагируют на угловое ускорение (вращение головы). Волосковые клетки в пятнах мешочка и матрикса реагируют на линейное ускорение (гравитацию). (См. Главу Вестибулярная система: структура и функции). Жидкость, окружающая волосковые клетки, называемая эндолимфа , богата калием.Этот активно поддерживаемый ионный дисбаланс обеспечивает запас энергии, который используется для запуска нейронных потенциалов действия при перемещении волосковых клеток. Плотные соединения между волосковыми клетками и соседними опорными клетками образуют барьер между эндолимфой и перилимфой, который поддерживает ионный дисбаланс.

Рисунок 12.1 иллюстрирует процесс механической трансдукции на концах волосковой клетки ресничек . Реснички выходят из апикальной поверхности волосковых клеток. Эти реснички увеличиваются в длину вдоль последовательной оси.Есть крошечные нитевидные соединения от кончика каждой реснички к неспецифическому катионному каналу на стороне более высокой соседней реснички. Концевые звенья функционируют как веревка, соединенная с откидным люком. Когда реснички изгибаются в сторону самой высокой, каналы открываются, как люк. Открытие этих каналов позволяет притоку калия, который, в свою очередь, открывает кальциевые каналы, которые инициируют рецепторный потенциал. Этот механизм преобразует механическую энергию в нервные импульсы.Входящий внутрь ток K + деполяризует клетку и открывает зависимые от напряжения кальциевые каналы. Это, в свою очередь, вызывает высвобождение нейротрансмиттера на базальном конце волосковой клетки, вызывая потенциал действия в дендритах VIII черепного нерва.

Нажмите кнопку воспроизведения, чтобы увидеть механическое преобразование в электрическое. Волосковые клетки обычно имеют небольшой приток K + в состоянии покоя, поэтому в афферентных нейронах имеется некоторая базовая активность. Изгиб ресничек к самой высокой открывает калиевые каналы и увеличивает афферентную активность.Изгиб ресничек в обратном направлении закрывает каналы и снижает афферентную активность. Сгибание ресничек в сторону не влияет на спонтанную нервную активность.

12.2 Звук: интенсивность, частота, механизмы внешнего и среднего уха, согласование импеданса по площади и соотношению рычагов

Слуховая система преобразовывает широкий диапазон слабых механических сигналов в сложную серию электрических сигналов в центральной нервной системе. Звук - это серия изменений давления в воздухе.Звуки часто меняются по частоте и интенсивности со временем. Люди могут улавливать звуки, вызывающие движения, лишь немного более сильные, чем у броуновского движения. Очевидно, если бы мы услышали это непрерывное (кроме абсолютного нуля) движение молекул воздуха, у нас не было бы тишины.

Рис. 12.2
Воздухопроводящие звуки в конечном итоге перемещают жидкость во внутреннем ухе.

Рисунок 12.2 изображены эти чередующиеся волны сжатия и разрежения (давления), падающие на ухо. Ушная раковина и наружный слуховой проход собирают эти волны, слегка изменяют их и направляют к барабанной перепонке. Возникающие в результате движения барабанной перепонки передаются через три косточки среднего уха (молоточек, наковальня и стремечко) в жидкость внутреннего уха. Подошва стремени плотно прилегает к овальному окну костной улитки. Внутреннее ухо наполнено жидкостью.Поскольку жидкость несжимаема, по мере того, как стремечка движется внутрь и наружу, необходимо компенсирующее движение в противоположном направлении. Обратите внимание, что мембрана круглого окна, расположенная под овальным окном, движется в противоположном направлении.

Поскольку барабанная перепонка имеет большую площадь, чем подошва стремени, происходит гидравлическое усиление звукового давления. Кроме того, поскольку плечо молоточка, к которому прикреплена барабанная перепонка, длиннее, чем плечо наковальни, к которому прикреплены стремени, происходит небольшое усиление звукового давления за счет действия рычага.Эти два механизма согласования импеданса эффективно передают звук, передаваемый из воздуха, в жидкость внутреннего уха. Если бы устройство для среднего уха ( барабанная перепонка и косточки) отсутствовало, то звук, достигающий овальных и круглых окон, был бы в значительной степени отражен.

12.3 Улитка: три лестницы, базилярная мембрана, движение волосковых клеток

Рис. 12.3
Поперечное сечение спиральной улитки.

Улитка представляет собой длинную спиральную трубку с тремя каналами, разделенными двумя тонкими мембранами. Верхняя трубка - это вестибульная лестница, которая соединяется с овальным окном. Нижняя трубка - это scala tympani , которая соединена с круглым окном. Средняя трубка представляет собой среднюю лестницу, которая содержит Орган Корти . Кортиев орган расположен на базилярной мембране, которая образует разделение между средней лестницей и барабанной перепонкой.

На рис. 12.3 показано поперечное сечение улитки. Три лестницы (вестибульные, средние, барабанные) разрезаются в нескольких местах по спирали вокруг центрального ядра. У человека улитка делает 2-1 / 2 оборота (отсюда 5 разрезов в поперечном сечении по средней линии). Плотно закрученная форма дала название улитке, что по-гречески означает улитка (как в раковине). Как объясняется в Tonotopic Organization, высокочастотные звуки стимулируют основание улитки, тогда как низкочастотные звуки стимулируют верхушку.Эта особенность изображена на анимации на Рисунке 12.3 с нервными импульсами (имеющими цвет от красного до синего, представляющими низкие и высокие частоты соответственно), выходящими из разных витков улитки. Активность на рисунке 12.3 будет генерироваться белым шумом, у которого все частоты имеют равные амплитуды. Движущиеся точки предназначены для обозначения афферентных потенциалов действия. Низкие частоты передаются на вершине улитки и представлены красными точками. Высокие частоты передаются в основании улитки и представлены синими точками.Следствием такого расположения является то, что низкие частоты находятся в центральном ядре улиткового нерва, а высокие - снаружи.

Рисунок 12.4
Детальный разрез одного витка канала улитки.

На рисунке 12.4 показано одно поперечное сечение улитки. Звуковые волны заставляют овальные и круглые окна в основании улитки двигаться в противоположных направлениях (см. Рисунок 12.2). Это вызывает смещение базилярной мембраны и запускает бегущую волну, которая распространяется от основания к вершине улитки (см. Рис. 12.7). Бегущая волна увеличивается по амплитуде по мере движения и достигает пика в месте, которое напрямую связано с частотой звука. На рисунке показан участок улитки, который движется в ответ на звук.

Рисунок 12.5 иллюстрирует увеличенное изображение Кортиевского органа. Бегущая волна заставляет базилярную мембрану и, следовательно, Кортиев орган двигаться вверх и вниз.Орган Корти имеет центральную опору жесткости, образованную парными столбчатыми клетками. Клетки волос выступают из верхней части Кортиевского органа. Текториальная (кровельная) мембрана удерживается на месте шарнирным механизмом на стороне кортиевого органа и плавает над волосковыми клетками. Поскольку базилярная и текториальная мембраны перемещаются вверх и вниз вместе с бегущей волной, шарнирный механизм заставляет текториальную мембрану перемещаться латерально по волосковым клеткам. Это поперечное срезающее движение сгибает реснички на вершине волосковых клеток, натягивает тонкие звенья кончика и открывает каналы люка (см.рисунок 12.1). Приток калия, а затем кальция вызывает высвобождение нейротрансмиттера, который, в свою очередь, вызывает ВПСП, который инициирует потенциалы действия в афферентах VIII черепного нерва. Большинство афферентных дендритов устанавливают синаптические контакты с внутренними волосковыми клетками.

Рисунок 12.6 смотрит на Кортиев орган. Существует два типа волосковых клеток: внутренних и внешних . Есть один ряд внутренних волосковых клеток и три ряда внешних волосковых клеток.Большинство афферентных дендритов синапсов на внутренних волосковых клетках. Большинство эфферентных аксонов синапсов на наружных волосковых клетках. Наружные волосковые клетки активны. Они движутся в ответ на звук и усиливают бегущую волну. Наружные волосковые клетки также издают звуки, которые можно уловить в наружном слуховом проходе с помощью чувствительных микрофонов. Эти внутренние звуки, называемые отоакустической эмиссией , теперь используются для проверки новорожденных на предмет потери слуха. На рис. 12.6 показано полное иммунофлуоресцентное изображение улитки новорожденных мышей, показывающее три ряда наружных волосковых клеток и один ряд внутренних волосковых клеток.У зрелого человека улитка выглядела бы примерно так же. Наложенные схематически изображенные нейроны показывают типичный образец афферентных связей. Девяносто пять процентов афферентных синапсов VIII нерва находятся на внутренних волосковых клетках. Каждая внутренняя волосковая клетка устанавливает синаптические связи со многими афферентами. Каждый афферент соединяется только с одной внутренней волосковой клеткой. Около пяти процентов афферентных синапсов на внешних волосковых клетках. Эти афференты проходят значительное расстояние вдоль базилярной мембраны от своих ганглиозных клеток до синапсов на множестве внешних волосковых клеток.Менее одного процента (~ 0,5%) афферентных синапсов на множестве внутренних волосковых клеток. Микрофотография ниже любезно предоставлена ​​доктором Дугласом Котанче, отделением отоларингологии Детской больницы Бостона, Гарвардской медицинской школы. Печатается с разрешения.

Рис. 12.6
Волосковые клетки на базилярной мембране млекопитающих.

12,4 Тонотопическая организация

Рисунок 12.7
Тонотопическая организация зрелой улитки человека.

Физические характеристики базилярной мембраны приводят к тому, что разные частоты достигают максимальных амплитуд в разных положениях. Как и на фортепиано, высокие частоты находятся на одном конце, а низкие - на другом. Высокие частоты передаются в основании улитки, а низкие частоты передаются в верхушке. На рисунке 12.7 показано, как улитка действует как частотный анализатор.Улитка кодирует высоту звука по месту максимальной вибрации. Обратите внимание на положение бегущей волны на разных частотах. (Осторожно! Сначала может показаться, что низкие частоты не связаны с базой.) Выберите разные частоты, поворачивая циферблат. Если на вашем компьютере включен звук, вы услышите выбранный вами звук. Часто наблюдается потеря слуха на высоких частотах. Средняя потеря слуха у американских мужчин составляет около одного цикла в секунду в день (начиная примерно с 20 лет, поэтому у 50-летнего, вероятно, будут проблемы со слухом на частотах выше 10 кГц).Если вы не слышите высокие частоты, это может быть связано с динамиками вашего компьютера, но всегда стоит думать о сохранении слуха.

Слушая эти звуки, обратите внимание, что высокие частоты кажутся странно похожими. Подумайте о пациентах с кохлеарной имплантацией. Эти пациенты утратили функцию волосковых клеток. Их слуховой нерв стимулируется серией имплантированных электродов. Имплант может быть установлен только в основании улитки, потому что хирургически невозможно продеть тонкие проволоки более чем на 2/3 оборота.Таким образом, пациенты с кохлеарным имплантатом, вероятно, слышат что-то вроде высокочастотных звуков.

12.5 Диапазон звуков, на которые мы реагируем; Кривые нейронной настройки

На рисунке 12.8 показан диапазон частот и интенсивности звука, на который реагирует слуховая система человека. Наш абсолютный порог, минимальный уровень звука, который мы можем обнаружить, сильно зависит от частоты. На уровне боли уровень звука примерно на шесть порядков выше минимального слышимого порога. Уровень звукового давления (SPL) измеряется в децибелах (дБ). Децибелы - это логарифмическая шкала, где каждое увеличение на 6 дБ указывает на удвоение интенсивности. Воспринимаемая громкость звука зависит от его интенсивности. Звуковые частоты измеряются в Гц, (Гц) или циклах в секунду. Обычно мы слышим звуки от 20 Гц до 20 000 Гц. Частота звука связана с его высотой тона. Лучше всего слышать на частотах 3-4 кГц. Чувствительность слуха снижается на высоких и низких частотах, но в большей степени на высоких, чем на низких частотах.С возрастом обычно теряется высокочастотный слух.

Рисунок 12.8
Аудиометрическая кривая для человека с нормальным слухом и некоторые кривые нервной настройки.

Нейронный код центральной слуховой системы сложен. Тонотопическая организация поддерживается всей слуховой системой. Тонотопическая организация означает, что клетки, реагирующие на разные частоты, находятся в разных местах на каждом уровне центральной слуховой системы, и что существует стандартное (логарифмическое) соотношение между этим положением и частотой.Каждая ячейка имеет характеристическую частоту (CF). CF - это частота, на которую ячейка максимально реагирует. Клетка обычно реагирует на другие частоты, но только с большей интенсивностью. Кривая нейронной настройки - это график амплитуды звуков на различных частотах, необходимых для того, чтобы вызвать реакцию центрального слухового нейрона. Кривые настройки для нескольких разных нейронов наложены на кривые слышимости на рисунке 12.8. Изображенные нейроны имеют CF, которые варьируются от низких до высоких частот (и показаны соответственно красным и синим цветами).Если бы мы записывали со всех слуховых нейронов, мы бы в основном заполняли область в пределах кривых слышимости. Когда звуки мягкие, они будут стимулировать только те несколько нейронов с этим МВ, и, таким образом, нервная активность будет ограничена одним набором волокон или клеток в одном конкретном месте. По мере того, как звуки становятся громче, они стимулируют другие нейроны, и область активности увеличивается.

аспиранты Сара Баум, Хизер Тернер, Надика Диас, Дипна Таккар, Натали Сирисаенгтаксин и Джонатан Флинн из программы выпускников неврологии в UTHealth Хьюстоне дополнительно объясняют структуры, функции и пути слуховой системы в анимационном видео « The Journey of Sound ".

Проверьте свои знания

Передаются высокие частоты

А. на верхушке улитки

Б. у основания улитки

C. по всей улитке

Д. вибрациями стремени

E. у верхней височной извилины

Передаются высокие частоты

А.на верхушке улитки. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Это может показаться «задом наперед», но хотя канал улитки, кажется, сужается к верхушке, базилярная мембрана на самом деле становится шире.

Б. у основания улитки

C. по всей улитке

Д. вибрациями стремени

E. у верхней височной извилины

Передаются высокие частоты

А.на верхушке улитки

B. у основания улитки. Ответ ПРАВИЛЬНЫЙ!

C. по всей улитке

Д. вибрациями стремени

E. у верхней височной извилины

Передаются высокие частоты

А. на верхушке улитки

Б. у основания улитки

С.по всей улитке. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Высокие частоты не проходят далеко вдоль базилярной мембраны. (Кстати, низкие частоты проходят по всей длине улитки и, следовательно, причиняют наибольший ущерб, если они достаточно громкие.)

Д. вибрациями стремени

E. у верхней височной извилины

Передаются высокие частоты

А.на верхушке улитки

Б. у основания улитки

C. по всей улитке

D. по колебаниям стремени. Ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Звук передается в жидкость внутреннего уха посредством вибрации барабанной перепонки, молоточка, наковальни и стремени. Трансдукция, переход от механической энергии к нервным импульсам, происходит в волосковых клетках, в частности, через калиевые каналы на концах стереоцилий.

E. у верхней височной извилины

Передаются высокие частоты

А. на верхушке улитки

Б. у основания улитки

C. по всей улитке

Д. вибрациями стремени

E. у верхней височной извилины. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Слуховые афференты в конечном итоге достигают первичной слуховой коры в извилине Гешеля внутри островковой коры, и эта область тонотопически организована.Стимуляция этой области приводит к сознательному осознанию звука, но переход от механических вибраций к нервной активности происходит во внутреннем ухе.

Происходит преобразование механических сигналов в нейронные

А. у основания наружных волосковых клеток

Б.на K + каналах в стереоцилиях

С. между овальным и круглым окнами

D. в вестибулярной лестнице

E. в барабанной лестнице

Происходит преобразование механических сигналов в нейронные

A. у основания наружных волосковых клеток. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Трансдукция происходит как во внешних, так и во внутренних волосковых клетках.Большинство слуховых афферентов синапсов на внутренних волосковых клетках.

Б. на K + каналах в стереоцилиях

С. между овальным и круглым окнами

D. в вестибулярной лестнице

E. в барабанной лестнице

Происходит преобразование механических сигналов в нейронные

А. у основания наружных волосковых клеток

Б.на K + каналах в стереоцилиях. Ответ ПРАВИЛЬНЫЙ!

Движение ресничек открывает калиевые каналы. Приток калия вызывает последующий приток кальция и рецепторный потенциал, который может вызвать потенциал действия в афферентных дендритах.

С. между овальным и круглым окнами

D. в вестибулярной лестнице

E. в барабанной лестнице

Происходит преобразование механических сигналов в нейронные

А.у основания наружных волосковых клеток

Б. на K + каналах в стереоцилиях

C. между овальным и круглым окнами. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Разница давлений между овальным окном (scala vestibuli) и круглым окном (scala tympani) важна для генерации бегущей волны вдоль базилярной мембраны, но на этом этапе слуховой обработки сигнал все еще является механическим.

Д.в вестибульной лестнице

E. в барабанной лестнице

Происходит преобразование механических сигналов в нейронные

А. у основания наружных волосковых клеток

Б. на K + каналах в стереоцилиях

С. между овальным и круглым окнами

D. in the scala vestibuli Ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Разница давлений между овальным окном (scala vestibuli) и круглым окном (scala tympani) важна для генерации бегущей волны вдоль базилярной мембраны, но на этом этапе слуховой обработки сигнал все еще является механическим.

E. в барабанной лестнице

Происходит преобразование механических сигналов в нейронные

А. у основания наружных волосковых клеток

Б. на K + каналах в стереоцилиях

С. между овальным и круглым окнами

D. в вестибулярной лестнице

E. в барабанной лестнице. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Разница давлений между овальным окном (scala vestibuli) и круглым окном (scala tympani) важна для генерации бегущей волны вдоль базилярной мембраны, но на этом этапе слуховой обработки сигнал все еще является механическим.

Первичная слуховая кора находится в

А.теменная доля

Б. боковая поверхность затылочной доли

С. верхняя височная извилина

D. Парагиппокампальная извилина

E. средняя лобная извилина

Первичная слуховая кора находится в

A. теменная доля. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Теменная доля не является частью первичной слуховой коры.Первичная слуховая кора находится в верхней части верхней височной извилины; поперечные височные извилины Heschl.

Б. боковая поверхность затылочной доли

С. верхняя височная извилина

D. Парагиппокампальная извилина

E. средняя лобная извилина

Первичная слуховая кора находится в

А. теменная доля

Б.боковая поверхность затылочной доли. Ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Боковая поверхность затылочной доли не является частью первичной слуховой коры. Первичная слуховая кора находится в верхней части верхней височной извилины; поперечные височные извилины Heschl.

С. верхняя височная извилина

D. Парагиппокампальная извилина

E. средняя лобная извилина

Первичная слуховая кора находится в

А.теменная доля

Б. боковая поверхность затылочной доли

C. верхняя височная извилина. Ответ ПРАВИЛЬНЫЙ!

D. Парагиппокампальная извилина

E. средняя лобная извилина

Первичная слуховая кора находится в

А. теменная доля

Б. боковая поверхность затылочной доли

С.верхняя височная извилина

D. Парагиппокампальная извилина. Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Парагиппокампальная извилина не является частью первичной слуховой коры. Первичная слуховая кора находится в верхней части верхней височной извилины; поперечные височные извилины Heschl.

E. средняя лобная извилина

Первичная слуховая кора находится в

А.теменная доля

Б. боковая поверхность затылочной доли

С. верхняя височная извилина

D. Парагиппокампальная извилина

E. средняя лобная извилина. Ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Средняя лобная извилина не является частью первичной слуховой коры. Первичная слуховая кора находится в верхней части верхней височной извилины; поперечные височные извилины Heschl.

Кто из следующих участвует в прослушивании?

А.тройничный нерв

Б. латеральный лемниск

C. средний лемниск

D. pontine ядер

E. глазодвигательный нерв

Кто из следующих участвует в прослушивании?

A. тройничный нерв. Ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Нерв V - это общий соматический сенсорный нерв головы.

Б.боковой лемниск

C. средний лемниск

D. pontine ядер

E. глазодвигательный нерв

Кто из следующих участвует в прослушивании?

А. тройничный нерв

B. боковой лемниск. Ответ ПРАВИЛЬНЫЙ!

C. средний лемниск

D. pontine ядер

E.глазодвигательный нерв

Кто из следующих участвует в прослушивании?

А. тройничный нерв

Б. латеральный лемниск

C. medial lemniscus Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Система дорсально-медиального лемниска связана с соматосенсорной системой.

D. pontine ядер

E.глазодвигательный нерв

Кто из следующих участвует в прослушивании?

А. тройничный нерв

Б. латеральный лемниск

C. средний лемниск

D. pontine nuclei Этот ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Ядра моста имеют аксоны, которые проецируются на мозжечок.

E. глазодвигательный нерв

Кто из следующих участвует в прослушивании?

А.тройничный нерв

Б. латеральный лемниск

C. средний лемниск

D. pontine ядер

E. глазодвигательный нерв. Ответ НЕПРАВИЛЬНЫЙ.

Двигательные волокна в III иннервируют глазные мышцы.

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *